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产品资料

原代软骨细胞培养体系

原代软骨细胞培养体系
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:原代软骨细胞培养体系
  • 产品型号:BH-X019965
  • 产品展商:博湖
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简单介绍
收到原代软骨细胞培养体系后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
产品描述

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分产品现货,超低比价,货期短,价格优,公司产品仅用于科研售后齐全。

产品名称

规格

货号

原代软骨细胞培养体系

100ml/500ml

BH-X019965

培养方法

传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;

生长条件 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。

存储条件 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

培养操作步骤

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布; 

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片); 

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中; 

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及细胞化学检测。 


实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 

2.所使用的盖玻片应该为玻璃**,并经过铬酸洗液处理; 

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

产品介绍 In the presence of inorganic orthophosphate, the platelet-derived endothelial growth factor (PD-ECGF) thymidine phosphorylase (TP) (gliostatin) catalyses the reversible phospholytic cleavage of thymidine and deoxyuridine to their corresponding bases and 2-deoxyribose-1-phosphate. It is both chemotactic and mitogenic for endothelial cells and a non-heparin binding angiogenic factor present in platelets. It is also involved in transformation of fluoropyrimidines, cytotoxic agents used in the treatment of a variety of malignancies, into active cytotoxic metabolites.

Function : May have a role in maintaining the integrity of the blood vessels. Has growth promoting activity on endothelial cells, angiogenic activity in vivo and chemotactic activity on endothelial cells in vitro.

Catalyzes the reversible phosphorolysis of thymidine. The produced molecules are then utilized as carbon and energy sources or in the rescue of pyrimidine bases for nucleotide synthesis.

Subunit : Homodimer.

DISEASE : Defects in TYMP are the cause of mitochondrial DNA depletion syndrome type 1 (MTDPS1) [MIM:603041]; also known as myoneurogastrointestinal encephalomyopathy. A multisystem disease associated with mitochondrial dysfunction. It is clinically characterized by onset between the second and fifth decades of life, ptosis, progressive external ophthalmoplegia, gastrointestinal dysmotility (often pseudoobstruction), diffuse leukoencephalopathy, thin body habitus, peripheral neuropathy, and myopathy.

Similarity : Belongs to the thymidine/pyrimidine-nucleoside phosphorylase family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P19971.2

胸苷磷酸化酶(TP)是一种分子量为50-55kDa的蛋白,在氟嘧啶转化过程中起重要作用。TP具有血管**活性,与血小板源性内皮细胞生长因子的结构和作用相似,因此又被称为肿瘤相关血管生长因子。其可能通过血管**作用促进癌细胞的生长和转移。

英文名称  Anti-presenilin 2/PS-2

中文名称  早老素蛋白-2抗体

     AD 3L; AD 3LP; AD 4; AD 5; AD3L; AD3LP; AD4; AD5; Alzheimer disease 4; Alzheimer disease familial type 4; E5 1; Presenilin2; Presenilin 2; Presenilin 2; PS 2; PS2; PSEN 2; PSNL 2; PSNL2; STM 2; STM2.  

     1mg/1ml

 0.1ml/100μg  0.2ml/200μg

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

产品类型  一抗    
原代软骨细胞培养体系血管内皮生长因子165b检测试剂盒乙酰氯 CP,98.0%N-(2-羟乙基)乙二 99%

Rab-11A检测试剂盒乙酰氯 99%,无色N-(2-羟乙基)乙二 CP

尘螨IgG4检测试剂盒酰氯 98%α-糜蛋白酶 800 usp u/mg

TSHα亚单位检测试剂盒琥珀酸二甲酯 98%α-糜蛋白酶 1000 usp u/mg

FAT1检测试剂盒马来酰亚 98.5%胰蛋白酶(牛胰脏) potency ≥2500 units/mg

精氨酸检测试剂盒丁二酸酐 AR,98%胰蛋白酶(猪胰脏) 1:250

睾酮受体检测试剂盒3-氯酰氯 95%胰蛋白酶(牛胰脏) potency ≥3000 units/mg


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