●环境温度10℃～30℃，8小时内温度波动不超过±3℃，环境相对湿度低于85%。●严格按照使用说明书操作仪器，不得擅自更改操作步骤。●瓶内溶剂过滤器'>过滤器的维护●色谱柱的维护：柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动。柱温一般不超过40℃。流动相使用前要脱气;避免使用高粘度的溶剂作为流动相。以硅胶为基质的柱子，如C-18、C-8等，要控制好流动相的pH值在3.0～8.0之间。进样样品要适当提取纯化，严格控制进样量，避免超负荷进样。对250×4.6mm的柱子，每次**进样量应不超过100μg。避免柱头突然产生大的压力波动，扰动损伤柱床。泵启动过速、升压过快、样品阀搬动过慢等到，均可造成的柱压大的波动。每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来充分清洗色谱柱。对反相柱，可先用足量的等比例的水彻底洗净其中的酸、碱或盐类，再用甲醇或乙腈冲洗。若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。反相柱可保存在甲醇或乙腈中，正相柱保存在非极性有机溶剂(如己烷)中。●进样阀的维护：进样时，进样针应插到底。不使用时将针头留在进样器内。进样时应使用液相色谱专用平头进样针。常用

二、过滤任何颗粒物进入液相色谱系统后都会在柱子入口端被筛板挡住，*后的结果是将柱子堵塞，表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此，要采取各种预防措施，包括操作步骤和商品仪器自身的各种过滤设计，努力防止或减少颗粒物进入HPLC系统中，从而延长仪器和色谱柱的使用寿命，并提高数据的可靠性。在HPLC系统中，颗粒物的主要来源有三个途径：流动相、被测样品和仪器系统部件的磨损物。1、流动相如果流动相均由高效document.write('')液相色谱document.write('')级溶剂组成，流动相没有必要过滤。这是因为高效液相色谱级的有机溶剂，例如乙腈、甲醇等，在制造的工艺过程中都已经过了0.2μm微孔滤膜过滤。同样的，无论你是买的HPLC级的水还是在实验室使用超纯水净化系统制备的水，*后一步也是通过0.2μm微孔滤膜。然而，如果有任何一种缓冲液中加入了固体物，例如磷酸盐，流动相过滤将是必要的一个步骤。虽然缓冲盐可能是可溶解的、高纯的，但它还是可能含有颗粒物质，例如在盖试剂瓶的塑料内盖时，塑料瓶盖子与瓶口边缘挤压就会产生塑料颗粒。在这种情况下，添加的一种固体物可能完全溶解了

高效液相色谱仪'>液相色谱仪在医**面的应用高效液相色谱有四方面重要的作用。①分离分析**的组分含量：由于一种药剂常含有多组分，一次即可将各维生素B6、D1、A、E同时分离并定出含量。又如止痛药或退烧药也可用此法分离并测得各组分的含量。②**生产中进行中间控制：生产**素时，首先要了解发酵液中的主体与付产物的存在情况。例如：青霉素、四环素、头孢子菌素、红霉素、柔红霉素、庆大霉素等的发酵产物，均可用C18柱和甲醇及缓冲液配制的流动相或用离子对法，分析主体及其收产物的含量。对普鲁卡因酰胺、茶碱等可进行主体含量的测定，对****可测定主体含量及其降解产物，以便保证**的热量。③分析**在体内的残量：这是近来研究新药效能很主要的内容之一，如冬凌草甲素是植物中的一组分，有**效果，但是毒性大。测定其在血清中含量很重要，现在可用C18柱及甲醇水为流动相，测定处理后的血清样品，即可得到血中的含量。如磺胺类药品在血清及尿中含量也不允许太大，可用C18柱及酸性乙醇为流动相，测定含量后，则可估计*合适的用药剂量。又如四环素、***酸、止痛药、退烧药、护糖尿病的**等，在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、

流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器'>过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法**不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0～3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。2、柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内;(2)样品污染沉积。处理对于**种情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之

色谱法中*古老的一种,液相色谱分析是指流动相为液体的色谱技术.但通过改进填料的粒度及柱压,经典的液相柱色谱的基础上引入了气相色谱的塔板理论,技术上采用了高压输液泵,高效固定相和高灵敏度的检测器,实现了分析速度快、分离效率高和操作自动化,这种色谱技术被称为高效液相色谱法(HighperformanceliquidchromatographyHPLC中药的成分非常复杂,以往常用的薄层色谱等方法因其精密度、准确度、灵敏度、重现性差而不能满足现代中药的需要。高效液相色谱仪'>液相色谱仪正是以其稳定、可靠、高效的特点成为中药研究的*重要的分析方法。目前高效液相色谱已经广泛应用于生物碱、皂苷、黄酮、蒽醌、香豆素等各种中药有效成分的测定。近年来对高效液相色谱监测中药的研究非常多,由于高效液相色谱集经典液相色谱和气相色谱的优势于一身,无论柱效、选择性还是分析水平都达到或超过了,近年来对高效液相色谱的缺乏之处进行了改进,使这项技术日臻完善。通过对从单味药到复方的不同配伍、煎煮时间等的研究,中药研究的大趋势是全成分分析.才干发现中药中化学成分的变化规律,找到中药机理之间的有机联系。中药成分繁多,且各种成分

1.HPLC的日常操作条件：温度：10—30℃;相对湿度<80%;*好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。2.泵的保养：1)使用流动相尽量要清洁;2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗;3)流动相交换时要防止沉淀;4)避免泵内堵塞或有气泡;3.进样器的保养：1)每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染;4.柱的保养：1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;2)当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净;3)要注意流动相的脱气;4)避免使用高粘度的溶剂作为流动相;5)进样样品要提纯;6)严格控制进样量;7)每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品;8)每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱;9)若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭;5.检测器(UV)的保养：1)紫外灯的保养：在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器;在分析完成后，马上关闭检测器。2)样品池要保养。

1.色谱柱中的流动相会排干吗?不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。2.使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题?如果经常需要改变流路

EssentiaLC-15C秉承岛津高效液相色谱仪一贯优良品质的同时，为满足更加简便•高效的分析需求，设计开发而成，丰富了LC产品线，在保留**性能与扩展性的基础上，提供更加人性化的LCsolution15C色谱工作站，充分满足各行各业分析工作者的日常分析需求。EssentiaLC-15C产品概述每个设备组件的特点概述如下。LC-15C送液单元继承ProminenceLC-20AT**性能的LC-15C，通过传送系统的改进，发挥出****的送液性能。采用浮动柱塞支持机构，提高柱塞、柱塞密封圈的使用寿命，是耐用性出色的高性能送液单元。SPD-15C紫外可见双波长检测器SPD-15C是追求**性能和功能的紫外可见双波长检测器，高灵敏度和宽线性范围是从ProminenceSPD-20A继承下来的优异性能。四种测定方式(双波长检测、比例色谱、波长时间程序和停泵扫描)可对应各种测定需求。使用选配件溶剂循环阀，不仅可以降低分析成本，更有利于环保。SIL-10AF自动进样器SIL-10AF是追求可靠性和高性能的自动进样器。提高了每个部件的品质，保证长期连续使用的稳定性。独特的进样方式可获得

液相色谱仪在使用中整个液路系统有两个地方易产生气泡!1、泵头吸液白管。2、检测口流通池。气泡产生的原因：温度上升，压力下降!温度上升或柱温上升，当接近试剂沸点时，试剂汽化产生气泡，试剂中已含微小气泡，因加热变大而产生气泡。压力下降产生气泡，流动相中一直包含微小气泡，无论超声过滤，均不能池底去掉它，那么当压力下降时，微小气泡将长大，且多个小气泡易聚集成大气泡，而影响正常实验。下面分部位说明气泡产生原因及解决办法:一、泵头及吸液白管。1、泵头：泵头是压力变化*剧烈的地方，也是*易产生气泡的地方，泵头靠负压而吸液，而负压必然使流动相中的小气泡长大，当泵腔变正压时，已长大的气泡未必能全部变小流入后续液路，则泵腔内将积存气泡，从而影响吸液精度，鉴于此，泵头上专门设计了排气阀，便于泵头排气，观察柱压稳定了说明泵头排气成功。2、吸液白管长气泡。a、吸液白管接触空气部位漏气，产生可见气泡，吸液白管是常压和负压交臂变化部位，其漏表现为大气进入白管内，而不易见到管内液体漏出。处理方法：更换白管。b、滤头堵：滤头堵使得液体流入滤头的速度下降，泵强制吸液而产生真空气泡。判断：拔掉滤头不再长气泡则是滤头堵。处理

3月10日，大连依利特分析仪器有限公司承担的国家发改委高技术产业示范工程项目——高效液相色谱仪及系列产品规模化生产通过专家组验收。该项目总投资2266万元，建成的高效液相色谱仪及系列产品生产线具备年产1000台(套)生产能力。在建设期间该项目还获得发明**授权5件，负责制定了《高效液相色谱仪》等3项国家标准。高效液相色谱仪提高了高效液相色谱法的分离度、灵敏度、速度、精度和可靠性，其先进的串联泵头及单向阀设计理念，融合了当今世界上*先进的制造应用经验。当用户使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物中不同物质与固定相的相互作用不同，会以不同的顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，*后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质，保证输液的精度、脉动等性能指标。高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛应用于化学和生化分析中。2008年该公司开发的三聚氰胺高效液相色谱检测分析系统，就曾为国内乳制品企业检验与生产实际解决了燃眉之急。

1.过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。2.对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3.打开液相色谱工作站'>色谱工作站(包括计算机软件和色谱仪)，连接好流动相管道，连接检测系统。4进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5.有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10?ml/min。6.调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。7.设计走样方法。点击file，选取select?users?and?methods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击new?method。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样

每天用足够的时间来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得*大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!------一定得做!新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试，即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且，在以后的使用中，应时常对色谱柱进行测试。卡套柱的安装(不加预柱)1.将卡套架套入柱芯2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套(见左图)3.将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片4.将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧5.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端6.连接到液相色谱仪，PEEK接头手拧即可;若为不锈钢接头应使用专用扳手注意：使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。卡套柱的安装(加预柱)1.将卡套架套入柱芯2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯(见左图)3.将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片4.将"子弹头"预柱放入卡套片内5.将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧6.然后依同样的

例1.稠环芳烃分析(环境气体分析)样品：含六苯并苯等8种稠环芳烃的混合物色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，配有色谱工作站'>色谱工作站检测器：UV紫外检测器，340nm色谱柱：C18键合相(ODS-224),5μm，柱长25cm，柱径4.6mm流动相：甲醇-二氯甲烷(8:2)混合溶剂流速：1mL/min进样：20μL结果：所有组分在25min之内全部流出，各组分完全分离，组分出峰顺序为：六苯并苯，二苯二萘嵌苯，三苯二萘嵌苯，苯萘并二萘嵌苯，四苯二萘嵌苯，萘六苯并苯，二苯萘并二萘嵌苯，苯菲并五苯。例2.磺胺分析(**分析)样品：磺胺、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑和甲氧苄氨嘧啶的混合物色谱仪：“南京科捷LC600”液相色谱仪，740色谱数据处理机检测器：UV481型紫外检测器，波长240nm色谱柱：μ-BondapakC18,5μm，柱长25cm，柱径4.6mm流动相：由KH2PO4(0.05mol/L)和Na2HPO4(0.05mol/L)以及MeOH所组成，其用量比例为200:10:165，流速：1mL/min

高效液相色谱仪(HPLC)现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样，在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。而且良好规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。大家在学校或接受仪器公司培训的时候，老师或工程师会提出很多的操作注意事项。但要是总结归纳一下，*重要的有三点：脱气、过滤和冲洗。本文围绕这三点进行讨论，给新从事HPLC分析的工作者一点操作建议，希望能对正确的操作仪器有一点帮助。更欢迎有经验的专家介绍使用经验，提出好建议。一、脱气流动相脱气对于避免液相色谱系统出问题，顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不希望有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的力量，由于气体的压缩比与液体相比大的多，因而当气泡存在时，你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大，液相泵将不能输送任何溶剂，而且如果压力低于预先设定的压力低限，泵将停止工作。有些泵设计可以很好