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PCR定量试剂盒的使用特点

日期:2024-11-24 21:16
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摘要:
    荧光定量PCR法检测的是来SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。
而探针自法是当探针结合到目标序列上以百后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发度出荧光。从两者的原理上来看,不难知判断,荧光PCR法更加简单方便,而且成本低。而探针法特异性更强道。

    ①荧光域值(threshold)的设定:PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号,荧光域值的缺省设置是3~15个循环的荧光信号标准偏差的10倍

    ②Ct值:C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数 二、3个阶段 ①荧光背景信号阶段:在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号。

PCR定量试剂盒的使用具有下列特点:

    1. 即开即用,用户只需要提供样品RNA模板。

    2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。

    3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

    4. 特异性高,引物是根据蒲公英探针法荧光定量PCR试剂盒高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。

    5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。

    6. 本产品只能用于科研。