-
细胞转染的途径
转染的途径:转染的途径大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类:1.物理介导:电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例。2.化学介导:方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术。3.生物介导:方法有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目
发布时间:2024-12-23 15:50
点击次数:23 次
-
细胞培养实验基本操作
细胞培养实验基本操作:1、进无菌室前要洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。2、操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞
发布时间:2024-12-16 11:48
点击次数:21 次
-
胎牛血清制备过程的主要步骤
胎牛血清制备过程的主要步骤:1、采集胎牛血液制备胎牛血清的第1步是采集胎牛的血液。这需要在专业场所进行,确保采集的胎牛来自健康且受监控的牧场。采集血液需要遵循伦理和动物福利的法规和标准。确保供体是5-8月龄的牛胚胎。2、血液分离采集的胎牛血液会经过离心分离,将血浆与血细胞分开。血浆中包含了胎牛血清的大部分有利于细胞体外生长和繁殖的营养成分,如蛋白质、生长因子和**。3、过滤和清理分离后的血浆会经过
发布时间:2024-12-09 11:00
点击次数:39 次
-
双抗夹心法实验操作注意事项
双抗夹心法实验操作注意事项:1、样品稀释:(1)稀释血清避免假阳性的发生(把蛋白按照一定的倍数稀释,如10倍、20倍,将抗原进行稀释包被反应;用稀释好的阳性参阅血清和阴性参阅血清进行孵育后洗刷,加入酶结合物进行反应,孵育洗涤,加入底物显色,停止反应后分别测定O.D值,O.D值≥1.0的抗原稀释度为适合的包被浓度。阴性参阅血清O.D值<0.1-0.2。这样阳性参阅血清和阴性参阅血清的O.D值就会有明
发布时间:2024-12-03 13:58
点击次数:52 次
-
实验室细胞复苏具体过程
细胞复苏是指将冻存在液氮里边或者-80℃冰箱中的细胞解冻,再培养传代。细胞复苏应采用快速融化的方法,这样的目的是为了让细胞外结晶在很短的时间内融化,从而避免慢悠悠的融化,使得水分渗入细胞内再结晶,从而对细胞再次造成伤害,从而影响细胞的存活率。细胞复苏具体过程:1:细胞是冻在-80℃的环境里面的,所以拿出来后,应该尽快去37℃水浴锅里解冻(我一般是放在PE手套里面,然后在37摄氏度的水域上快速融化。
发布时间:2024-11-26 15:06
点击次数:66 次
-
大鼠4-羟基壬烯酸(HNE)ELISA试剂盒样本收集处理
大鼠4-羟基壬烯酸(HNE)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联**吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。样本收集处理:1.血清:室温血液自然凝
发布时间:2024-11-19 10:51
点击次数:79 次
-
常见的五种生化试剂盒的原理及用途
五种常见生化试剂盒的原理及用途:1、多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒(比色法):多酚氧化酶(PPO)能够催化Catechol产生醌,后者在525nm有特征光吸收,测定
发布时间:2024-11-14 10:49
点击次数:81 次
-
标准品与对照品的管理条例
标准品与对照品的管理条例:1.规范购入使用台账,严格表明购入时间、生产批号、来源、数量、使用期限等内容;申购的标准品或对照品的批号要与新颁布标准品或对照品批号相符;2.严格按照规定条件进行储存,标准品或对照品的性状极不稳定,对储存条件和方式非常苛刻;3.规范管理和使用:(1)严格按照说明书要求,由于标准品或对照品的不稳定性,若不安产品说明书的要求操作,极易造成较大的误差,从而影响检测结果;(2)称
发布时间:2024-11-06 10:42
点击次数:124 次
-
PCR反应被抑制或效率较低调整过程
PCR反应被抑制或效率较低调整过程:一旦确定反应被抑制或效率较低,则可采取一些步骤将效率值重新调整到理想范围内。1、对于抑制作用,可去除模板浓度高的反应孔并重新分析标准曲线。如果效率重新回到110%以下,则分析良好。2、另一种解决方案是重新纯化模板。切记应延长干燥时间,以去除乙醇沉淀过程中的乙醇,或采用另外的柱上洗涤液将离液盐从硅胶纯化物中去除。3、通过分析优化可解决效率低下的问题。此过程有时相对
发布时间:2024-10-28 16:15
点击次数:121 次
-
标准物质使用管理说明
标准物质一般是指一种确定了具有一个或多个足够均匀的特性值的物质或材料,作为分析测量行业中的“量具',在校准测量仪器和装置、评价测量分析方法、测量物质或材料特性值和考核分析人员的操作技术水平,以及在过程中产品的质量控制等领域起着*的作用。企业或实验室应当建立标准物质的科学管理制度,以保证标准物质全流程的可追溯性、使信息传递正确有效,保证流转过程数量和贮存准确、让使用更规范与合理。一、标准物质来源合
发布时间:2024-10-23 17:01
点击次数:98 次
-
ELISA实验洗涤过程操作技巧小结
聚苯乙烯因其具有较强的吸附蛋白质的性能而被广泛用于ELISA实验的固相载体,聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,因此需要通过洗涤**在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。上述提到的血清中存在红细胞或纤维蛋白原,可以在加样前离心时得到控制,同样也可以通过适当增加洗涤次数和浸泡时间减轻或避免对实验结果的影响,同样,对于血
发布时间:2024-10-16 14:35
点击次数:130 次
-
细胞培养操作
细胞培养操作:1)复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4mL培养基混合均匀。在1000rpm条件下离心3min,弃去上清液,加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8mL培养基,培养过夜)。第2天换液并检查细胞密度。2)细胞传代
发布时间:2024-10-12 16:08
点击次数:81 次
-
检测试剂盒保存方法
检测试剂盒保存方法:1.检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗刷液可能会有结晶分出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗刷时不影响成果。3.各步加样均应运用加样器,并常常校正其准确性,以防止试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,引荐运用排枪加样。4.请每次测定的一起做规范曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高
发布时间:2024-10-06 10:20
点击次数:106 次
-
实时荧光定量PCR使用的荧光物质原理简述
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:1.TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可
发布时间:2024-09-30 10:15
点击次数:111 次
-
从外观和性能上筛选血清分析
在实际筛选时,主要从血清外观和实验操作时细胞的生长状态进行。从外观上:1.颜色:根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度。胎牛血清或多或少总有点溶血,因为胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂;2.澄清度:高质量的胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡;3.血清沉淀:血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有影响,沉淀的
发布时间:2024-09-23 10:23
点击次数:100 次