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ELISA检测试剂盒保存方法
检测试剂盒保存方法:1.检测试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2.浓洗刷液可能会有结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响成果。3.各步加样均应运用加样器，并常常校正其准确性，以防止试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，引荐运用排枪加样。4.请每次测定的一起做规范曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高
发布时间：2025-02-18 11:07
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细胞冻存主要操作步骤
细胞冻存主要操作步骤为：1、选择处于对数生长期的细胞，在冻存前1天*换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心（1000r/min，10分钟）。2、去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加
发布时间：2025-02-10 14:53
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抗原抗体反应的特点有什么？
抗原抗体反应的特点：1）、特异性：抗原与抗体结合反应的专一性。分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。2）、交叉反应：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。3）、可逆性：解离后抗原抗体仍保持原有理化性质和生物活性。
发布时间：2025-02-06 10:09
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PCR反应Taq DNA聚合酶是什么
一般TaqDNA聚合酶活性半衰期为92.5℃130min，95℃40min，97℃5min。现在人们又发现许多新的耐热的DNA聚合酶，这些酶的活性在高温下活性可维持更长时间。TaqDNA聚合酶的酶活性单位定义为74℃下，30min，掺入10nmol/LdNTP到核酸中所需的酶量。TaqDNA聚合酶的一个致命弱点是它的出错率，一般PCR中出错率为2×10-4核苷酸/每轮循环，在利用PCR克隆和进行序
发布时间：2025-01-20 10:48
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酶的活性及浓度的调节方式
调节酶的浓度酶浓度的调节主要有两种方式，一种是诱导或抑制剂的合成;一种是调节酶的降解。调节酶的活性**通过与细胞膜或细胞内受体相结合而引起一系列生物学效应，以此来调节酶活性。反馈抑制调节许多小分子物质的合成是由一连串的反应组成的，催化此物质生成的第1步的酶，往往被它们的终端产物抑制。这种抑制叫反馈抑制(feedbackinhibition)。例如由苏氨酸生物合成为异亮氨酸，要经过5步，反应第1步有
发布时间：2025-01-16 13:34
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MTT法测细胞相对数和相对活力
活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比，也与细胞活力呈正比。 细胞悬液以1000rpm离心10分钟，弃上清液。 沉淀加入0.5－1mlMTT，吹打成悬液。 37℃下保温2小时。 加入4—5ml酸化异丙醇（定容），打匀。
发布时间：2025-01-10 10:11
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PCR反应没有目的片段考虑方面
PCR反应没有目的片段考虑方面:1.含有PCR反应抑制物对样本稀释(l:100和1:1000)后再扩增，并通过在已知阳性模板中加入原始PCR混合物进行扩增，验证抑制物的存在；2.模板浓度太低，扩增循环数不够尽可能降低退火温度，在降落PCR的低温度增加10个扩增循环；3.非特异扩增增加起始模板的变性温度(通常为95℃5min)，采用降落PCR和热启动PCR4.扩增反应混合液中各成分浓度不对改变Taq
发布时间：2024-12-24 16:54
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反向 PCR的特点
常规PCR是扩增两引物之间的DNA片段,反向PCR(reversePCR)是用引物来扩增两引物以外的DNA片段。一般先用限制性内切酶酶解DNA(目的基因中不存在该酶的酶切位点,且片段应短于2～3kb),然后用连接酶使带有黏性末端的靶片段自身环化,后用一对反向引物进行PCR,得到的线性DNA将含有两引物外侧的未知序列。该技术可对未知序列扩增后进行分析,如探索邻接已知DNA片段的序列。反向PCR已成功
发布时间：2024-12-17 16:59
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细胞培养一般过程
细胞培养一般过程：1、细胞传代（贴壁细胞）：试剂：PBS,胰酶，含血清的培养基；流程：显微镜下看一看培养皿里的细胞多不多，太多（80%~90%）会导致代谢废物很多，先吸掉废液，再用PBS洗一洗，同时太多会导致细胞黏在一起，这时候就需要加点胰酶消除它们之间的粘性，是否消除完，在显微镜下看一看，看完加入适宜的含血清的培养基，中和一下胰酶，这叫吹打，除此之外，细胞太多了，把一部分细胞移出来，加入适量的培
发布时间：2024-12-10 11:51
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ELISA试剂盒检测目的抗原辨别方法
利用干扰实验即可辨别ELISA试剂盒是否检测目的抗原，方法如下：1、将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody:antigen≈1:2的混合孵育液。2、37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体3、后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物4、实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配，试剂盒检测抗体针对的是
发布时间：2024-12-02 10:46
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ELISA检测试剂盒试验常见标本处理
ELISA检测试剂盒试验常见标本处理：1.血清：室温血液私人凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，如有沉淀形成，应再次离心3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000
发布时间：2024-11-25 10:37
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PCR反应的主要物质解说
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+详细解说：1.引物引物是PCR特异性反应的关键，PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。2.酶及其浓度目前有两种TaqDNA聚合酶，一种是从栖热水生杆菌中提纯的天然酶，另一种为大肠菌合成的基因工程酶。催化
发布时间：2024-11-18 10:37
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大鼠ELISA检测试剂盒试验血清解冻过程
大鼠ELISA检测试剂盒试验血清解冻过程：1、请勿将血清置于37℃太久，若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。2、按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。3、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。4、随时将之摇晃均匀，使温度
发布时间：2024-11-11 16:08
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选择DNA提取试剂盒考虑因素
选择合适的DNA提取试剂盒是进行分子生物学实验的关键步骤。以下是选择DNA提取试剂盒时需要考虑的几个因素：1、样本类型：不同的样本类型（如血液、组织、植物、**、土壤等）可能需要不同的提取方法。确保选择的试剂盒适用于你的样本类型。2、DNA纯度要求：根据后续实验的需求，你可能需要高纯度的DNA。一些试剂盒专门设计用于去除PCR抑制剂，这对于后续的分子生物学实验（如PCR、qPCR）尤为重要。3、D
发布时间：2024-11-04 15:23
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PCR反应内参基因的三大作用
PCR反应内参基因的三大作用：1.样品提取质量的判断标准在PCR实验中，内参基因首先作为判断样品提取是否成功的标准。当使用逆转录得到的cDNA进行PCR实验时，如果结果为阴性，不能直接得出样品中没有目的基因的结论。只有当内参基因的CT值处于一个合理的范围内，例如20左右，我们才能确信样品制备没有问题，从而确保实验结果的可靠性。2.目的基因表达量的计算基础在进行相对定量PCR时，内参基因是计算目的基
发布时间：2024-10-29 11:04
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