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PCR反应阴性对照出现明显扩增分析
日期:2024-11-22 00:20
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摘要:
PCR反应阴性对照出现明显扩增
1、 反应体系组分(如水)被污染:实验过程中,更换新的Mix或者水重复实验。
2、 标本间的交叉污染或产物污染:反应体系在超净工作台内配制,对实验室进行严格的区分,减少气溶胶污染;使用带滤芯的枪头。
3、 引物二聚体的出现:引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
4、引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。在35循环后阴性对照出现扩增属正常情况,可配合熔解曲线进行分析。
PCR反应阴性对照出现明显扩增
2、 标本间的交叉污染或产物污染:反应体系在超净工作台内配制,对实验室进行严格的区分,减少气溶胶污染;使用带滤芯的枪头。
3、 引物二聚体的出现:引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
4、引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。在35循环后阴性对照出现扩增属正常情况,可配合熔解曲线进行分析。