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ELISA试剂盒鉴定方法详述
日期:2024-08-24 20:43
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摘要:
鉴别方法:
Ⅰ:利用干扰实验即可辨别elisa试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:
1、将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液。
2、37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体
3、后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物
4、实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造elisa试剂盒。
5、如果标准曲线无...
鉴别方法:
Ⅰ:利用干扰实验即可辨别elisa试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:
1、将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液。
2、37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体
3、后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物
4、实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造elisa试剂盒。
5、如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。
Ⅱ:如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可辨别ELISA试剂盒是否造假,方法如下:
1、取出购买的试剂盒A的包被板两条。
2、一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
3、另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
4、后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。
5、实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
6、如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。