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人胚胎肾细胞转化细胞原代培养过程

日期:2025-01-10 02:14
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摘要:人胚胎肾细胞转化细胞原代培养

人胚胎肾细胞转化细胞原代培养过程:

1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。

2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。

3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。

4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。

5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中,离心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。

6.加入10ml培养液,吹打混匀,取样计数。

7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中,轻轻摇晃混匀,在培养瓶上。

      客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。