文章详情
PCR产物纯化效率提升方法
日期：2024-08-24 20:50
浏览次数：42
摘要：
PCR扩增完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳检测，在条带单一无其他杂带的情况下，可以直接对产物进行纯化。提升PCR产物纯化效率提升方法如下：
1.模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响pcr效率；
2.模板量，过高的模板量反而会降低pcr效率特异性；
3.引物，引物的长度xu要再效率和特异性间获得优化，其次要控制引物gc含量；
4.聚合酶，要考虑酶的保真率和速度；
5.mg离子浓度，mg离子浓度过高会降低特异性，浓度过低会降低效率；
6.退火温度：退火温度低，效率会高，但特异性降低；退...
PCR扩增完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳检测，在条带单一无其他杂带的情况下，可以直接对产物进行纯化。提升PCR产物纯化效率提升方法如下：
1.模板纯度，有较多蛋白或其他杂质时，会一定程度影响pcr效率；
2.模板量，过高的模板量反而会降低pcr效率特异性；
3.引物，引物的长度xu要再效率和特异性间获得优化，其次要控制引物gc含量；
4.聚合酶，要考虑酶的保真率和速度；
5.mg离子浓度，mg离子浓度过高会降低特异性，浓度过低会降低效率；
6.退火温度：退火温度低，效率会高，但特异性降低；退火温度高，效率降低，但特异性会提高，需优化。