细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
英文简称
规格
货号
RBL-2H3:RBL2H3
1×106
P-X1144
产品详情：
细胞别称：RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3；大鼠嗜碱性白血病细胞
种属来源：大鼠
年龄性别：
组织来源：外周血；化学诱变嗜碱性细胞；白血病
生长特性：贴壁生长
细胞形态：成纤维细胞
背景简介：RBL-2H3是1978年国立牙科研究所的学实验室从Wistar大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。这些细胞具有高亲和力的IgE受体。通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。这株细胞广泛地用于研究肥大细胞FcERI和分泌的生化途径。RBL-2H3细胞是研究FcERI结构的模型。它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面，包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。虽然几乎所有批号的FBS都支持细胞的生长，但在某些批号中FcERI集聚后脱粒化得更好。另一株大鼠嗜碱性细胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不会脱粒化。
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：histamine
保藏机构：ATCC; CRL-2256 DSMZ; ACC-312
培养基：90% DMEM+10% FBS+双抗
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：~50-60小时
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
公司正在出售的产品：
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磷脂酸磷酸酶2C抗体 |
丝裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗体 MAP4K5 |
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PAP2c |
1号染色体开放阅读框180抗体 C1orf180 |
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庚型肝炎病毒多聚蛋白/Hepatitis G Virus抗体 |
Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys56) antibody |
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HGV Polyprotein |
PE标记小鼠CD31单克隆抗体 mouse CD31/PE |
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2号染色体开放阅读框16抗体 C2orf16 |
肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体 FKBP11 |
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肌动蛋白结合蛋白7抗体 CORO7 |
血小板源性生长因子受体β样蛋白抗体 PDGFRL |
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鸡卵白蛋白/卵清蛋白抗体 Ovalbumin |
蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51抗体 PTPIP51 |
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嗅觉受体家族5亚基1抗体 OR5T1 |
碘酪氨酸脱碘酶抗体 IYD |
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大鼠CD36elisa检测试剂盒 |
F-box蛋白45抗体 FBXO45 |
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小鼠雌二醇（E2）elisa检测试剂盒 |
FITC标记人CD64单克隆抗体 human CD64/FITC |
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二代测序快速DNA建库试剂盒for Illumina 24次 |
磷酸化组蛋白去乙酰化酶6抗体 phospho-HDAC6 (Ser22) |
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寡核苷酸探针非位素AP－BCIP/NBT法DNA斑点杂交完全试剂盒 |
猫眼综合征染色体候选基因6抗体 CECR6 |
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小鼠胃泌素（GAS）elisa检测试剂盒 |
细胞磷酸二酯酶4（PDE4）活性荧光定量检测试剂盒 |
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大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa检测试剂盒 |
RBL-2H3大鼠嗜碱性白血病细胞人肾上腺素（EPI）elisa检测试剂盒 |
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人CD44分子(CD44)elisa分析检测试剂盒 |
小鼠胶原吡啶交联(PYD)elisa检测试剂盒 |
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体液脊髓过氧化酶（MPO）活性高质敏感比色法定量检测试剂盒 |
大鼠促肾上皮质释放(CRH)elisa检测试剂盒 |
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。
