细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
英文简称
规格
货号
RLE-6TN:RLE6TN
1×106
P-X1147
产品详情：
细胞别称：RLE-6TN
种属来源：大鼠
年龄性别：雄，56天
组织来源：肺
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：RLE-6TN（大鼠肺上皮-T-抗原阴性）细胞系来源于使用链霉蛋白酶溶液气道灌注从 56 天大的雄性 F344 大鼠中分离的肺泡 II 型细胞。SV40-T 抗原的表达通过核染色和 PCR 呈阴性，表明该细胞是通过自发永生化衍生的。
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：
保藏机构：ATCC
培养基：RPMI-1640 +10% FBS+1%P/S
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1）准备DMEM培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）冻存细胞的复苏：：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜
。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：1、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3、轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
实验原理：
公司正在出售的产品：
|
FITC标记人CD42b单克隆抗体 human CD42b/FITC |
四分子交联体5/四旋蛋白5/四次跨膜蛋白5抗体 TSPAN5 |
|
FMS样酪氨酸激酶3配体抗体 FLT3L |
20号染色体开放阅读框100抗体 GCX1/C20orf100 |
|
硫氧还蛋白相关跨膜蛋白2抗体 TMX2 |
RASL11B蛋白抗体 RASL11B |
|
球蛋白超家族成员12抗体 IGSF12 |
PRDM10k单克隆抗体 PRDM10 |
|
3号染色体开放阅读框38抗体 C3orf38 |
糖蛋白β-1B抗体 Hemopexin |
|
肌球蛋白1H抗体 MYO1H |
岩藻糖转移酶8抗体 FUT8 |
|
畸形表皮自调节因子1抗体 Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 |
蛋白酶体抑制剂亚基PI31抗体 PSMF1 |
|
血管内皮生长因子受体2抗体 VEGFR2 |
凋亡相关蛋白2重组兔单克隆抗体 PDCD2 |
|
大鼠3氧代5α类固醇4脱氢酶2(SRD5A2)elisa分析检测试剂盒 |
FC段γ受体3/球蛋白G Fc段受体III单克隆抗体 CD16 |
|
小鼠成神经细胞瘤RAS 病毒(v-ras)癌基因源物elisa检测试剂盒 |
FITC标记小鼠CD49e单克隆抗体 mouse/rat CD49e/FITC |
|
原果胶含量测试盒 |
磷脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体 PI 3 Kinase Class 3 |
|
通用型RFLP基因分析试剂盒 |
球蛋白D重链保守区抗体 IGHD |
|
小鼠胃泌素(GAS)elisa检测试剂盒 |
组蛋白脱乙酰化酶5（HDAC5）活性比色法定量检测试剂盒 |
|
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa分析检测试剂盒 |
RLE-6TN大鼠肺泡II型细胞人脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）elisa检测试剂盒 |
|
人ES1蛋白系物，线粒体(C21orf33/HES1/KNPI)elisa分析检测试剂盒 |
小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)elisa检测试剂盒 |
|
组织多胺氧化酶（PAO）活性比色法定量检测试剂盒 |
大鼠弹性蛋白(ELN)elisa检测试剂盒 |
实验步骤：
1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上，利用293T细胞进行慢病毒包装，获得含目的基因的慢病毒；
2 转染前24 h进行细胞铺板，转染时细胞密度控制在80%左右；
3 天加入适量病毒悬液感染细胞，并置于37 ℃，5% CO2培养箱中孵育；
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基，并继续培养；
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养，直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%，获得稳转细胞系。
