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  • 产品名称:9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞

  • 产品型号:P-X1118
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞公司正在出售的产品:MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞贴壁细胞上皮细胞样MA-891:MA891小鼠细胞系组织来源:乳腺人胰岛素抗体(Anti-Ins)elisa检测试剂盒组织人体鼻病毒(rhinovirus))定性检测试剂盒
详情介绍:

9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞


英文简称

规格

货号

9L/lacZ:9LlacZ

1×106

P-X1118

产品详情:


生长特性 贴壁细胞

细胞形态 成纤维细胞样

生长培养基 DMEM10%FBS1%P/S

冻存条件

冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度:液氮

培养条件

气相:空气,95%CO25%

温度:37℃

推荐传代比例 1:4-1:8

推荐换液频率 2~3/

背景描述 The cells constitutively express the lacZ reporter gene product, E. coli derived beta-gal, as revealed on tissue sections by histochemical stain, and single tumor cells can be identified. Lymphocytes and other responding cells can be identified by double labeling with antibodies on the same slide. The contrast between stained cells and background facilitates image analysis. The beta-gal expression is very stable, but cells may need to be re-cloned after months of growth in culture.

年龄(性别) 雄性

组织来源 脑,胶质细胞

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 胶质瘤细胞

生物等级 1

致瘤性 Yes, forms tumors in the brains of CD Fischer 344 rats

基因表达情况 beta galactosidase (beta-gal)

保藏机构 ATCC; CRL-2200

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备DMEM培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二.细胞处理:

1)冻存细胞的复苏::将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜

。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3、轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例:
1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.
2、1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

实验原理:


实验步骤:


1 将目的基因构建到合适的慢病毒载体上,利用293T细胞进行慢病毒包装,获得含目的基因的慢病毒;
2 转染前24 h进行细胞铺板,转染时细胞密度控制在80%左右;
3 天加入适量病毒悬液感染细胞,并置于37 ℃,5% CO2培养箱中孵育;
4 24 h后用新鲜培养基替换含有病毒的培养基,并继续培养;
5 在转染3-4天后开始加药筛选培养,直至显微镜下观察荧光细胞比例为100%,获得稳转细胞系。

公司正在出售的产品:

鱼胰岛素受体α亚基(ISR-α)elisa分析检测试剂盒

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Guinea pig IgM / PE

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G蛋白偶联受体GPR85蛋白抗体

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GPR85

tRNA剪接内切酶2抗体  Anti-TSEN2

大鼠胶原C末端肽(CTX)elisa分析检测试剂盒

小鼠CC趋化因子受体6(CCR-6)elisa分析检测试剂盒

CTX ELISA Kit

9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞CCR-6ELISAKit

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α/β水解酶4抗体

HLA-DRB4

ABHD4


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