酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体
产品型号：BH-K013370
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体在抗原刺激下产生的，体液性抗体由B细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对球蛋白G、A、M、E了解较多，对D的功能了解较少。

详情介绍：

抗体反应特点：

1.高度特异性，特异性是抗原抗体反应的主要特征，特定抗原决定簇只与特定抗体结合；

2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为：Ag+AbAg·Ab；

3.适当浓度和比例；

4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。

抗体反应的因素：

1.电解质：抗原抗体特异结合后，胶体粒便可发生脱水作用，此时易受电解质影响，如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚，于是出现明显的凝集或沉淀现象。

2.酸碱度:合适的pH为6-8。

3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。

别名 Cek 6; Elkh; Eph tyrosine kinase 2; EPH2; EphB1; Ephrin receptor Eph B1 precursor; Ephrin type B receptor 1; HEK 6; NET; Neuronally expressed EPH related tyrosine kinase; Tyrosine protein kinase receptor EPH 2.
英文名称 Anti-EphB1/Eph receptor B1

中文名称 酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体

浓度 1mg/1ml

规格 1mg/1ml

抗体来源 Rabbit

克隆类型 polyclonal

交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

产品类型一抗

研究领域心血管细胞生物神经生物学信号转导激酶和磷酸酶细胞膜受体

蛋白分子量 predicted molecular weight: 106kDa

性状 Lyophilized or Liquid

免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EphB1/Eph receptor B1

亚型 IgG

本公司产品仅用于科研实验。

抗体的荧光标记法：

（一）基本原理

赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。

（二）仪器和试剂

1.待偶联抗体；

2.碳酸氢钠缓冲液；

3.叠氮钠；

4.庵氰酸荧光素；

5.电磁搅拌器。

实验步骤：

1、石蜡切片，常规脱蜡至水

2、蒸馏水冲洗，pbs 浸泡5 分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。

3、3%双氧水去离子水（无色液体）孵育15-20 分钟，以消除内源性过氧物酶活性。

4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20 分钟，倾去，勿洗。

5、滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。

6、PBS 冲洗，3 分钟3 次。

7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。

8、PBS 冲洗，3 分钟3 次。

9、滴加试剂C（橙色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。

10、PBS 冲洗，3 分钟3 次。

11、显色剂显色（DAB 或AEC）

12、自来水充分冲洗。

13、如果需要，可进行复染，脱水，透明。

14、选择适当的封片剂封片。

抗体分子标记技术：

（一）原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

（二）准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

2.仪器

凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。

（三）操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；

2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

抗体的种类：

抗体是在抗原刺激下产生的，体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多，对D的功能了解较少。

（1） IgG：是血清中浓度大的一类球蛋白，约占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后，其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体，分子量16万～18万，可以通过兔的胎盘，但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中，参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。

（2） IgM：由5个球蛋白单位组成的五聚体，在血清中的含量仅次于IgG，分子量90万，是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后，IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG，主要分布在血管内，可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体，免作用很强，是IgG的100倍，但由于含量仅为IgG的1/10，且持续时间短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中，参与凝集反应和补体结合反应。

（3） IgA：有单体和双体两种形式。单体存在于血清中，分子量约为17万，亦称为血清型IgA，有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中，如唾液、泪液、初乳、气管分泌液，以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA，由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生，分子量40万，含量较单体高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一种特殊的糖蛋白，为单位体结构，分子量19万，由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成，在血清中含量甚微，是一种致敏抗体，容易吸附在**表面，当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。

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