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  • 产品名称:酪氨酸蛋白激酶A4受体抗体

  • 产品型号:BH-K013526
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
酪氨酸蛋白激酶A4受体抗体在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。
详情介绍:

别    名   Cek 8; CEK8; EK8; Eph A4; EPH receptor A4; EPH-like kinase 8; EphA4; EPHA4_HUMAN; Ephrin receptor Eph A4; Ephrin receptor EphA4; Ephrin type A receptor 4; Ephrin type-A receptor 4; HEK 8; HEK8; hEK8; Receptor protein tyrosine kinase HEK 8; Receptor protein tyrosine kinase HEK8; Receptor protein-tyrosine kinase HEK8; Sek 1; SEK; TYRO 1; TYRO 1 protein tyrosine kinase; TYRO1; Tyrosine protein kinase receptor SEK; Tyrosine protein kinase TYRO1; Tyrosine-protein kinase receptor SEK; Tyrosine-protein kinase TYRO1.
英文名称  Anti-EphA4 R/Eph receptor A4

中文名称  酪氨酸蛋白激酶A4受体抗体

浓    度  1mg/1ml

浓    度  1mg/1ml

 格  1mg/1ml    

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat

产品类型  一抗

研究领域  肿瘤 **学 生长因子和** 细胞膜受体 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 106kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EphA4 R

亚    型  IgG 

本公司产品仅用于科研实验

抗体的荧光标记法:

(一)基本原理

赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。

(二)仪器和试剂

1.待偶联抗体;

2.碳酸氢钠缓冲液;

3.叠氮钠;

4.庵氰酸荧光素;

5.电磁搅拌器。

抗体反应特点:

1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;

2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;

3.适当浓度和比例;

4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。

抗体反应的因素:

1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。

2.酸碱度:合适的pH为6-8。

3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。

实验步骤:

1、石蜡切片,常规脱蜡至水

2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。

3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。

4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。

5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。

6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。

7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。

8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。

9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。

10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。

11、显色剂显色(DAB 或AEC)

12、自来水充分冲洗。

13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。

14、选择适当的封片剂封片。

 

抗体分子标记技术:

(一)原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

(二)准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;

2.仪器

凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。

(三)操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;

2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

UACA  葡萄膜自身抗原Uaca抗体 0.2ml

RPL5  核糖体蛋白L5抗体 0.2ml

Coronin 3  冠蛋白3抗体 0.2ml

MEOX 2  间充质同源盒蛋白2抗体 0.2ml

ETHE1  乙基丙二酸脑病蛋白抗体 0.2ml

SPC25  纺锤体极点构成蛋白25抗体 0.2ml

MPP9/MPHOSPH9  有丝分裂细胞周期蛋白MPP9抗体 0.2ml

ANKRD53  锚蛋白重复域53抗体 0.2ml

ICAM5/Telencephalin  细胞间粘附分子5抗体 0.1ml

CDCREL/SEPT5  细胞周期调控相关蛋白1 0.2ml

stabilin1/STAB 1  管内皮细胞和血管内皮细胞受体1抗体 0.2ml

phospho-MST1R(Tyr1353)   磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体 0.1ml

HEATR2/HEAT repeat containing protein 2  HEATR2蛋白抗体 0.2ml

酪氨酸蛋白激酶A4受体抗体2-白氢溴物分子式:264.13分子量: C11H9N3·HBr英文名称:2- - white Dingqing bromideCAS号:40835-96-9

铁钾分子式:329.25分子量: K3FeC6N6英文名称:Potassium ferricyanideCAS号:13746-66-2

3-(1-嗪)-1,2-并异噻唑分子式:219.31分子量: C11H13N3S英文名称:3- (1- -1, 2- piperazine) benzisothiazoleCAS号:87691-87-0

直接湖蓝6B英文名称:Direct blue 6BCAS号:259444分子式:992.8分子量: C34H24N6Na4O16S4

番泻苷B英文名称:The BCAS号:128-57-4分子式:862.73912分子量:C43H38O20

2-氯-5-硝甲分子式:171.58分子量: C7H6ClNO2英文名称:2- -5- nitro tolueneCAS号:13290-74-9

2,2'-双((4S)-4-苄-2-恶唑啉)分子式:320.39分子量: C20H20N2O2英文名称:2,2'- ((4S) - 4 - benzyl - 2 - oxazoline)CAS号:133463-88-4

锡酸钾分子式:298.95分子量: K2SnO3 ·3H2O英文名称:Potassium tinCAS号:12125-03-0

1-(4-氟苄)-2-氯并咪唑分子式:260.69分子量: C14H10ClFN2英文名称:1- (4-) -2-CAS号:84946-20-3

1-溴-4-异丙分子式:199.09分子量: C9H11Br英文名称:1- -4- ISOCAS号:586-61-8

抗体的种类:

抗体是在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。

(1) IgG:是血清中浓度大的一类球蛋白,约占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后,其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体,分子量16万~18万,可以通过兔的胎盘,但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中,参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。

(2) IgM:由5个球蛋白单位组成的五聚体,在血清中的含量仅次于IgG,分子量90万,是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后,IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG,主要分布在血管内,可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体,免作用很强,是IgG的100倍,但由于含量仅为IgG的1/10,且持续时间短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中,参与凝集反应和补体结合反应。

(3) IgA:有单体和双体两种形式。单体存在于血清中,分子量约为17万,亦称为血清型IgA,有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中,如唾液、泪液、初乳、气管分泌液,以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA,由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生,分子量40万,含量较单体高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

(4) IgE:是一种特殊的糖蛋白,为单位体结构,分子量19万,由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成,在血清中含量甚微,是一种致敏抗体,容易吸附在**表面,当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。

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