别 名 Beta urogastrone; Epidermal Growth Factor; Pro epidermal growth factor; URG; Urogastrone
英文名称 Anti-EGF
中文名称 表皮生长因子抗体（大鼠）
浓 度 1mg/1ml
浓 度 1mg/1ml
规 格 1mg/1ml
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Rat
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 信号转导 生长因子和**
蛋白分子量 predicted molecular weight: 5.8/133kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EGF C-terminus
亚 型 IgG
本公司产品仅用于科研实验。
抗体的荧光标记法：
（一）基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
（二）仪器和试剂
1.待偶联抗体；
2.碳酸氢钠缓冲液；
3.叠氮钠；
4.庵氰酸荧光素；
5.电磁搅拌器。
抗体反应特点：
1.高度特异性，特异性是抗原抗体反应的主要特征，特定抗原决定簇只与特定抗体结合；
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为：Ag+AbAg·Ab；
3.适当浓度和比例；
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
抗体反应的因素：
1.电解质 ：抗原抗体特异结合后，胶体粒便可发生脱水作用，此时易受电解质影响，如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚，于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。
实验步骤：
1、石蜡切片，常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗，pbs 浸泡5 分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。
3、3%双氧水去离子水（无色液体）孵育15-20 分钟，以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20 分钟，倾去，勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
9、滴加试剂C（橙色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
11、显色剂显色（DAB 或AEC）
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要，可进行复染，脱水，透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体分子标记技术：
（一）原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
（二）准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；
2.仪器
凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。
（三）操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；
2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
Dnmt3 Beta DNA甲基转移酶-3β抗体 0.2ml
ER-α 雌受体α抗体 0.1ml
AMP deaminase 1 腺苷单磷酸脱氨酶1抗体 0.2ml
MLCK 肌球蛋白轻链激酶抗体 0.1ml
MTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor 血管紧张素Ⅱ2型受体相互作用蛋白抗体 0.1ml
ZNF379/ZDHHC9 锌指蛋白379抗体 0.2ml
NANOS2 生殖细胞增殖相关蛋白NANOS2抗体 0.2ml
EGF 表皮生长因子抗体（大鼠） 0.1ml
Fc γ RII a/CD32 球蛋白G Fc段受体Ⅱ抗体 0.1ml
ADCY9 腺苷酸环化酶9抗体 0.2ml
Metallothionein 3 金属硫蛋白3抗体 0.2ml
HSP1/Protamine P1 鱼精蛋白P1抗体 0.2ml
RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5) 磷酸化RNA聚合酶II CTD抗体 0.1ml
表皮生长因子抗体（大鼠）双5-四氮唑分子式：分子量： C2H3N9英文名称：5四氮唑双CAS号：127661-01-2
乙酰丙酮钼分子式：326.18分子量： C10H14MoO6英文名称：Acetyl acetoneCAS号：17524-05-9
高效氯氟菊酯英文名称：High efficiency chlorine and fluorineCAS号：91465-08-6分子式：449.85分子量： C23H19ClF3NO3
3,5-二氟硝分子式：159.09分子量： C6H3F2NO2英文名称：3,5- twoCAS号：2265-94-3
4-羟-6-巯吡唑并[3,4-d]嘧分子式：168.18分子量： C5H4N4OS英文名称：4- hydroxyl group -6- and [3,4-d]CAS号：24521-76-4
4,7-二甲-1,10-菲咯啉分子式：208.26分子量： C14H12N2英文名称：4,7- two methyl -1,10-CAS号：492472
N-(4-溴)咔唑分子式：分子量：英文名称：N- (4- Bromophenyl) carbazoleCAS号：
五氟分子式：168.06分子量： C6HF5英文名称：Five -CAS号：363-72-4
香叶木素英文名称：DiosmetinCAS号：520-34-3分子式：300.26分子量：C16H12O6
性媒介桃红3BM英文名称：Acid mordant red 3BMCAS号：6359-29-1分子式：431.43734分子量： C25H21NO6
抗体的种类：
抗体是在抗原刺激下产生的，体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多，对D的功能了解较少。
（1） IgG：是血清中浓度大的一类球蛋白，约占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后，其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体，分子量16万～18万，可以通过兔的胎盘，但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中，参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。
（2） IgM：由5个球蛋白单位组成的五聚体，在血清中的含量仅次于IgG，分子量90万，是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后，IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG，主要分布在血管内，可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体，免作用很强，是IgG的100倍，但由于含量仅为IgG的1/10，且持续时间短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中，参与凝集反应和补体结合反应。
（3） IgA：有单体和双体两种形式。单体存在于血清中，分子量约为17万，亦称为血清型IgA，有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中，如唾液、泪液、初乳、气管分泌液，以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA，由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生，分子量40万，含量较单体高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
（4） IgE：是一种特殊的糖蛋白，为单位体结构，分子量19万，由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成，在血清中含量甚微，是一种致敏抗体，容易吸附在**表面，当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。
