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  • 产品名称:eIF4E结合蛋白抗体

  • 产品型号:BH-K013560
  • 产品**:派瑞曼
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简单介绍:
eIF4E结合蛋白抗体在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。
详情介绍:

抗体的种类:

抗体是在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。

(1) IgG:是血清中浓度大的一类球蛋白,约占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后,其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体,分子量16万~18万,可以通过兔的胎盘,但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中,参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。

(2) IgM:由5个球蛋白单位组成的五聚体,在血清中的含量仅次于IgG,分子量90万,是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后,IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG,主要分布在血管内,可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体,免作用很强,是IgG的100倍,但由于含量仅为IgG的1/10,且持续时间短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中,参与凝集反应和补体结合反应。

(3) IgA:有单体和双体两种形式。单体存在于血清中,分子量约为17万,亦称为血清型IgA,有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中,如唾液、泪液、初乳、气管分泌液,以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA,由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生,分子量40万,含量较单体高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

(4) IgE:是一种特殊的糖蛋白,为单位体结构,分子量19万,由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成,在血清中含量甚微,是一种致敏抗体,容易吸附在**表面,当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。

别    名   eIF4EBP1; Eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1; Eukaryotic translation initiation factor 4E-binding protein 1; 4E BP1; 4EBP1; BP 1; BP1; eIF4E binding protein 1; eIF4E-binding protein 1; Eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1; MGC4316; PHAS I; PHASI; PHAS-I; PHAS; 4E-BP1; Phosphorylated heat- and acid-stable protein regulated by insulin 1; Phosphorylated heat and acid stable protein regulated by insulin 1; 4EBP1_HUMAN.
英文名称  Anti-eIF4EBP1/4EBP1

中文名称  eIF4E结合蛋白抗体

浓    度  1mg/1ml

浓    度  1mg/1ml

 格  1mg/1ml    

抗体来源  Rabbit  

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

产品类型  一抗

研究领域  肿瘤 细胞生物 **学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 13kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human 4E-BP1

亚    型  IgG 

本公司产品仅用于科研实验

抗体的荧光标记法:

(一)基本原理

赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。

(二)仪器和试剂

1.待偶联抗体;

2.碳酸氢钠缓冲液;

3.叠氮钠;

4.庵氰酸荧光素;

5.电磁搅拌器。

抗体反应特点:

1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;

2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;

3.适当浓度和比例;

4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。

抗体反应的因素:

1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。

2.酸碱度:合适的pH为6-8。

3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。

实验步骤:

1、石蜡切片,常规脱蜡至水

2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。

3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。

4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。

5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。

6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。

7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。

8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。

9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。

10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。

11、显色剂显色(DAB 或AEC)

12、自来水充分冲洗。

13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。

14、选择适当的封片剂封片。

 

抗体分子标记技术:

(一)原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

(二)准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;

2.仪器

凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。

(三)操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;

2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;

6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

ER/PR/c-erbB-2 Kit  ER/PR/c-erbB-2检测试剂盒(鼠单抗) 30人份

A2AR/Adenosine A2a receptor  腺苷A2A受体抗体 0.1ml

Acetyl-Histone H4(K5)  乙酰化组蛋白H4抗体 0.1ml

NIT1  腈水解酶1抗体 0.2ml

CTBP2  C末端结合蛋白2抗体 0.1ml

EGR3  早期生长反应蛋白3抗体 0.1ml

RNASE4/Angiogenin  血管**素核糖核酸酶4抗体(肌萎缩性侧索硬化症蛋白) 0.1ml

phospho-CD32B(Tyr291)  磷酸化CD32B抗体 0.1ml

ADCY10  腺苷酸环化酶10抗体 0.2ml

HIV1 p55+p24+p17  艾滋病病毒抗体 0.2ml

phospho-LSP1 (Ser204)  磷酸化白细胞F肌动蛋白结合蛋白抗体 0.1ml

TRPV2/VRL1  辣椒素受体样蛋白1抗体 0.1ml

CLUAP1  成簇相关蛋白1抗体 0.1ml

eIF4E结合蛋白抗体1-溴-3-n-己分子式:分子量: C12H17Br英文名称:1- -3-n- cyclohexyl benzene bromideCAS号:38409-59-5

5-溴-2-吡甲醛分子式:186.01分子量: C6H4BrNO英文名称:5- -2- pyridine formaldehydeCAS号:31181-90-5

甲绿英文名称:Methyl greenCAS号:1904440分子式:653.24分子量: C27H35BrCl3N3Zn

2,4,5-**噻唑分子式:127.21分子量: C6H9NS英文名称:2,4,5- three methylthiazoleCAS号:13623-11-5

4-(4-啉)吡分子式:164.2分子量: C9H12N2O英文名称:4- (4- morpholinyl) pyridineCAS号:2767-91-1

2-巯-5-甲氧-1H-并咪唑分子式:180.23分子量: C8H8N2OS英文名称:2- mercapto -5- methoxy -1H- benzimidazoleCAS号:37052-78-1

2,4-二羟二砜分子式:250.27分子量: C12H10O4S英文名称:2,4- two hydroxy twoCAS号:5397-34-2

双酚S分子式:250.27分子量: C12H10O4S;O2S(C6H4英文名称:Bisphenol SCAS号:29465

1-Boc-4-分子式:210.27分子量: C11H18N2O2英文名称:1-Boc-4- cyano piperidineCAS号:91419-52-2

5-氯-2-甲氧甲分子式:156.61分子量: C8H9ClO英文名称:5- Cl -2- aCAS号:3260-85-3

 

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