抗体的种类:
抗体是在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。
(1) IgG:是血清中浓度大的一类球蛋白,约占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后,其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体,分子量16万~18万,可以通过兔的胎盘,但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中,参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。
(2) IgM:由5个球蛋白单位组成的五聚体,在血清中的含量仅次于IgG,分子量90万,是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后,IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG,主要分布在血管内,可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体,免作用很强,是IgG的100倍,但由于含量仅为IgG的1/10,且持续时间短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中,参与凝集反应和补体结合反应。
(3) IgA:有单体和双体两种形式。单体存在于血清中,分子量约为17万,亦称为血清型IgA,有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中,如唾液、泪液、初乳、气管分泌液,以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA,由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生,分子量40万,含量较单体高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一种特殊的糖蛋白,为单位体结构,分子量19万,由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成,在血清中含量甚微,是一种致敏抗体,容易吸附在**表面,当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。
别 名 ACY 1; ACY1; ACY1D; ACYLASE; EC 3.5.1.14; N acyl L amino acid amidohydrolase
英文名称 Anti-ACY1/Aminoacylase1
中文名称 氨基酰化酶1抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse,
产品类型 一抗
研究领域 **学 信号转导
蛋白分子量 predicted molecular weight: 46kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACY1/Aminoacylase 1
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亚 型 IgG
本公司产品仅用于科研实验。
抗体的荧光标记法:
(一)基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
(二)仪器和试剂
1.待偶联抗体;
2.碳酸氢钠缓冲液;
3.叠氮钠;
4.庵氰酸荧光素;
5.电磁搅拌器。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
人脑肠肽 规格: 48T BGP/Gehrelin(Human brain-gut peptides) Elisa kit
人凋亡信号调节激酶I 规格: 48T ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit
人周期素D1 规格: 48T Human Cyclin-D1 ELISA Kit
人γ谷氨酰转移酶 规格: 48T GGT(Human gamma glutamyl transpeptidase) ELISA Kit
人抗钙蛋白酶抑素抗体 规格: 48T ACAST-D IV (Human autoantibodies against the C-terminal domain IV ) ELISA Kit
人抗IgA抗体 规格: 48T Human anti-IgA antibody ELISA Kit
人抗狂犬病毒抗体 规格: 48T anti-RV(Human anti-rabies virus antibody) ELISA Kit
人抗血小板抗体IgG/M/A 规格: 48T PA-IgG/M/A(Human platelet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit
人军团抗体IgA 规格: 48T LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) ELISA Kit
人6酮前列腺素F1a 规格: 48T 6-keto-PGF1a(Human 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit
人抑制素B 规格: 48T INH-B(Human inhibin B) ELISA Kit
NCI-H23(人非小肺)5×106cells/瓶×2
大鼠晶状体上完全培养基100mL
人食管英文名称:KYSE450
JAR(人胎盘绒毛膜)5×106cells/瓶×2
NIH/3T3(小鼠胚胎)5×106cells/瓶×2gersion
缓冲MUG琼脂/缓冲4-甲基伞形酮葡糖苷酸琼脂/Buffered MUG Agar滤膜MUG法检测食品中大肠数100克国产/进口
CNE(人鼻咽)5×106cells/瓶×2
NLN培养基(含维生素)/NLN Medium with vitaminsBR10升国产/进口
ZR-75-30(人腺)5×106cells/瓶×2
大鼠支气管成纤维完全培养基100mL
氨基酰化酶1抗体质量规格:HPLC≥98%,标准品Diphenylamine,≥99%
质量规格:HPLC≥98%,BRAnilinesulfate,98%
质量规格:HPLC≥98%,标准品oToluidine,≥99%
质量规格:HPLC≥98%,标准品2Chloroaniline,≥99.5%
质量规格:HPLC≥98%,标准品2Bromoaniline,98%
质量规格:HPLC≥98%,标准品4Bromoaniline,≥99.0%
质量规格:HPLC≥98%,标准品mToluidine,99.0%
质量规格:HPLC≥98%,标准品mChloroaniline,≥95%
质量规格:HPLC≥98%,标准品3Bromoaniline,98%
质量规格:HPLC≥98%,标准品Acetanilide,≥98.0%
质量规格:HPLC≥98%,标准品NEthylaniline,≥99.0%
质量规格:>90%,BROxanilide
质量规格:HPLC≥98%,标准品2Chloro4nitroaniline,99%
质量规格:HPLC≥98%,标准品mNitroaniline,≥98.0%
质量规格:≥90%,BR2,5Dichloroaniline,≥98.0%