产品名称：犬瘟热病毒RT-荧光PCR检测试剂盒

产品名称：犬瘟热病毒RT-荧光PCR检测试剂盒

货号：BH-P64491
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品RNA模板。
2. 引物和探针经过优化，灵敏性高。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 特异性高，引物是根据高度保守区设计，不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 RT-PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。

实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（*好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
Ai-RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC 荧光su标记兔抗人、大、小鼠磷suan化急性髓细胞白血病1蛋白抗体IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Insulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛su蛋白Multi-class aibodies： 0.5mg

层粘连蛋白受体1抗体 ai-MGr1-Ag/37LRP 0.2

SOCS3 英文名称： 细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体 0.1ml

Ferritin Heavy Chain 英文名称： 铁蛋白重链抗体 0.2ml

Rhesus aibody Rh Phospho-PFK2 (Ser467) 磷suan化6磷suan果糖激mei2抗体  0.1ml

Insulin protein (from porcine pancreas) 猪胰岛su蛋白Multi-class aibodies： 0.5mg

Thy-1/CD90 CD90(抗原)Multi-class aibodies： 0.5mg

Ai-cdc25A 细胞分裂周期蛋白25抗体Multi-class aibodies： 0.2ml

Rhesus aibody Rh OSM/Oncostatin M 抑瘤suM抗体  0.1ml

HA Kit Influenza 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝su (Hemagglutinin / HA) ELISA配对抗体 ELISA

TRPM3 英文名称： 瞬时受体电位离子通道蛋白3抗体(M亚家族) 0.2ml

CYP11B2 英文名称： 醛固tong合成meiCYP11B2抗体 0.2ml

Ai-cdc25A 细胞分裂周期蛋白25抗体Multi-class aibodies： 0.2ml

Scavenger Receptor BII 英文名称： 清道夫受体B2抗体 0.2ml

EPDR1 英文名称： 哺乳动物室管膜相关蛋白1抗体 0.2ml

谷氨suan受体2D抗体 Ai-NR2D/NMDAR2D 0.2ml

Ai-SLC39A6/FITC 荧光su标记SLC39A6抗体IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Rhesus aibody Rh phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182) 磷suan化原活化蛋白激meip38抗体  0.1ml

CAD(Caspase-Activated Deoxyribonuclease) Caspase 激活的脱氧核糖核suanmei(抗原)Multi-class aibodies： 0.5mg

犬瘟热病毒RT-荧光PCR检测试剂盒米吐尔(>98%,BC)组织氯霉su乙酰基转移mei（CAT）报告基因活性荧光定量检测试剂盒

盐suan吡哆盐suan组氨suan氯霉su乙酰基转移mei（CAT）报告基因活性荧光薄层色谱（TLC）检测试剂盒

硅组织氯霉su乙酰基转移mei（CAT）报告基因活性荧光薄层色谱（TLC）检测试剂盒

溴化钠舍雷肽mei分泌型性磷suanmei活性荧光定量检测试剂盒

六偏磷suan钠甘精胰岛su分泌型性磷suanmei化学发光法定量检测试剂盒

无脂肪suan牛血清白蛋白N-（2）-L-氨酰-L-谷氨酰通用型基因甲基化检测试剂盒

二羟基tong(>97%,BR)去羟肌基因甲基化特异性PCR扩增（MSP）试剂盒

心肌黄mei(>30U/mg,BR)琥珀酰明胶基因甲基化检测DNA修饰试剂盒

注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。