产品名称:人27kDa热休克蛋白(HSPB1)ELISA试剂盒步骤
英文名称:Human Heat Shock 27kDa Protein 1(HSPB1)ELISA Kit
货号:PH103645
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
ELISA检测概述
ELISA酶联试剂盒是以学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
公司产品优势:
1,全:公司提供上万种产品,涵盖了生物试剂,elisa试剂盒,标准品,培养基,原装耗材等,基本上各种科研所需产品在我司都能找到。
2,新:产品更新速度较快,基本上每周都有新产品出现。
3,优:产品质量好,零投诉。
4,品牌多:公司代理的试剂品牌:Amresco、Sigma、Fluka、Alfa、TCI、Merck等进口品牌,国产品牌我们价格更优,我们供应优级纯,分析纯,化学纯,试剂级,基准试剂,实验纯,教学试剂,高纯试剂,色谱纯,光谱纯,电子纯等试剂级别(可根据客户需求定制)。
5,售后:我公司具有上等的技术团队,产品一旦售出,产品仅用于科研实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。
倍他米松0.995 100mg
2,6-二甲基0.998 100mg
D-泛酸钙0.999 100mg
邻二酚0.999 500mg
酮康(含干冰运输费)0.999 100mg
磺胺甲氧哒嗪0.997 100mg
卡巴多0.98 100mg
丁基黄原酸钾0.997 50mg
虫螨畏0.95 50mg
3-Aminophenol0.999 500mg
2,2’,3,4,4’,5,5’-0.984 5mg转钴胺素蛋白2抗体
跨膜蛋白74抗体
细胞生长抑制基因1蛋白抗体
甲状腺素T4抗体
甲基双加氧酶TET2抗体
转录因子CP2抗体
TGFB1诱导抗凋亡因子1抗体
扩张型心肌病蛋白1G抗体
硫氧还蛋白5抗体
转录因子Tbx18抗体
肿瘤坏死因子配体超家族成员12A抗体
糖皮质诱导肿瘤坏死因子受体抗体
促甲状腺素受体抗体(N端)
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