别 名 4)-dienoyl-CoA isomerase; 5)-Delta(2; Delta(3 5) Delta(2 4) dienoyl CoA isomerase; Delta(3 5) Delta(2 4) dienoyl CoA isomerase mitochondrial; Delta(3; Delta3 5 delta2 4 dienoyl CoA isomerase; Dienoyl CoA isomerase; ECH 1; Ech1; ECH1_HUMAN; Enoyl Coenzyme A hydratase 1; Enoyl Coenzyme A hydratase 1 peroxisomal; HPXEL; mitochondrial; MS1034; Peroxisomal enoyl CoA hydratase 1; Peroxisomal enoyl coenzyme A hydratase like protein.
英文名称 Anti-ECH1
中文名称 烯酰辅酶A水合酶1抗体
浓 度 1mg/1ml
浓 度 1mg/1ml
规 格 1mg/1ml
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞类型标志物 新陈代谢
蛋白分子量 predicted molecular weight: 32kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ECH1
亚 型 IgG
本公司产品仅用于科研实验。
抗体的荧光标记法:
(一)基本原理
赖氨酸残基的游离e-氨基可与FITC(其激发波长为492nm,发射光波长为525nm)共价结合。与FITC结合的抗体可用为特异性的探针,以测定细胞相应抗原的存在。FITC具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值,0.85)形成的偶联物的稳定性很好。
(二)仪器和试剂
1.待偶联抗体;
2.碳酸氢钠缓冲液;
3.叠氮钠;
4.庵氰酸荧光素;
5.电磁搅拌器。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应温度。
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所**的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
转移生长因子–β2抗体 规格: 0.1ml 英文::Anti-TGF-β2
T细胞负调节蛋白之一抗体 规格: 0.2ml 英文::Anti-VSIG4 Antibody
抗磷酸化原癌基因c-kit抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-phospho-c-kit/SCFR/CD117
ABI1/SSH3BP1蛋白抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-ABI1/SSH3BP1
膜粘连蛋白 Ⅲ抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-Annexin Ⅲ
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗体 规格: 0.1ml 英文::Anti-TRAIL/Apo2L
细胞质膜微囊蛋白-1抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-Cav-1
刺激分子B7-1蛋白抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-CD80/B7-1
P53凋亡刺激蛋白2抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-ASPP2
桥连整合因子蛋白抗体 规格:0.1ml 英文::Anti-BIN1
烯酰辅酶A水合酶1抗体5,6,7,8-四氢喹啉分子式:133.19分子量: C9H11N英文名称:5,6,7,8- fourCAS号:10500-57-9
磷酸二氢铝分子式:317.94分子量: AlH6O12P3英文名称:Two hydrogen phosphateCAS号:13530-50-2
亚铬酸铜分子式:163.54分子量: CrCuO3英文名称:亚铬酸铜CAS号:12018-10-9
薯蓣皂苷英文名称:DioscinCAS号:19057-60-4分子式:869.04358分子量:C45H72O16
辛夷脂素英文名称:FargesinCAS号:31008-19-2分子式:370.39578分子量:C21H22O6
新品红英文名称:New redCAS号:3248-91-7分子式:365.9分子量: C22H24ClN3
(新铜试剂)双环己酮草酰二腙英文名称:(neocuproine) dicyclohexyl ketone oxalyl two hydrazoneCAS号:370-81-0分子式:278.35分子量: C14H22N4O2
葡萄糖酸钾分子式:234.2387分子量: C6H11KO7英文名称:Potassium glucoseCAS号:299-27-4
番茄汁英文名称:Tomato JuiceCAS号:81-27-6分子式:862.74分子量:C42H38O20
2-溴二并呋喃分子式:247.09分子量: C12H7BrO英文名称:2- two benzene and benzeneCAS号:86-76-0
抗体的种类:
抗体是在抗原刺激下产生的,体液性抗体由B淋细胞系产生。根据其化学结构和抗原的不同可分为IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5种类型.目前对疫球蛋白G、A、M、E了解较多,对D的功能了解较少。
(1) IgG:是血清中浓度大的一类球蛋白,约占疫球蛋白含量的70~80%,50%分布于血浆。机体受到抗原初次刺激后,其产生时间仅次于IgM。在抗体介导的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白单体,分子量16万~18万,可以通过兔的胎盘,但不能通过猪和牛的胎盘。在体内可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵袭。在体外的血清学反应中,参与沉淀反应、凝集反应、补体结合反应和中和反应。
(2) IgM:由5个球蛋白单位组成的五聚体,在血清中的含量仅次于IgG,分子量90万,是体内大的球蛋白。抗原初次刺激机体后,IgM出现早,在血清中的含量仅次于IgG,主要分布在血管内,可以通过激活补体发挥溶菌、溶细胞及中和病毒的作用。因其是五聚体,免作用很强,是IgG的100倍,但由于含量仅为IgG的1/10,且持续时间短,所以在抗感染疫中不能起主要作用。在体外的血清学反应中,参与凝集反应和补体结合反应。
(3) IgA:有单体和双体两种形式。单体存在于血清中,分子量约为17万,亦称为血清型IgA,有**和抗病毒作用。双体主要存在于外分泌液中,如唾液、泪液、初乳、气管分泌液,以初乳中的含量高。双体IgA亦称为分泌型IgA,由存在于粘膜和组织上的浆细胞产生,分子量40万,含量较单体高6~8倍,是粘膜的重要防御因素,可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。
(4) IgE:是一种特殊的糖蛋白,为单位体结构,分子量19万,由消化道、呼吸道粘膜固有层及局部结中的浆细胞所形成,在血清中含量甚微,是一种致敏抗体,容易吸附在**表面,当与相应抗原结合所引起过敏反应。在机体抵抗**和病毒的感染中几乎无作用。