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多克隆抗体的佐剂应用
多克隆抗体又简称多抗。与之相对应的叫单克隆抗体,简称单抗。
抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,*终产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹**地命中目标一样。另一方面,即使是同一种抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。
1.佐剂的类型 目前实践中常应用的佐剂有氢氧化铝胶、明矾、弗氏佐剂、脂质体和石蜡
油等。也有采用结合杆菌等分枝杆菌、白喉杆菌以及细小棒状杆菌等。
⑴ 弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant,IFA)
羊毛脂 1 份
石蜡油 5 份
混合,高压**后保存。用时加热融化,冷却至 50℃左右,加抗原进行乳化处理。
⑵ 弗氏完全佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)
弗氏不完全佐剂 10ml
卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 灭活处理。
初次**时,*好用弗氏完全佐剂,以刺激机体产生较强的**反应。再次**时,一般不用完全佐剂,而采用弗氏不完全佐剂。但在研究分枝杆菌及相关抗原时,一般不用弗氏完全佐剂,以免卡介苗的干扰。
⑶ 脂质体:是人工制备的类脂质的小球体,由一个或多个酷似细胞膜的类脂双分子层组成,这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两性物质,他们被包裹在脂质体内部的水相中,或插入类脂双分子层或吸附、联接在脂质体的表面,起到明显的**增强作用。
⑷ 油佐剂 :采用植物油和矿物油均可,包括豆油、花生油、油菜油等。目前应用*广的矿物油。 10 号 白油(石蜡油) 100ml
硬脂酸铝 2g
司本 80 6ml
混合加热融化,分装。用时按下列配方进行乳化。
油相 3 份
水相(加 4%吐温-80) 1 份
先把油相搅拌起来,然后缓慢加入水相乳化。司本是油分散剂,吐温是水分散剂,均有利于
乳化。
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