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质粒提取中的振荡到底该怎么振荡?

质粒提取中的振荡到底该怎么振荡?

基本上我都是把管子上下颠倒7-8次,不需要太过用力。如果你用qiagen的试剂盒,直到溶液絮状沉淀全部由蓝变白即可。之后在冰上放置15分钟让其分层就可以离心了。有的时候肉眼看不见沉淀未必就没有沉淀,可以在加酒精洗脱的时候移到小管子里高速离心(14000r)2-5分钟也许就可以看见了。  

如果你是普通试剂盒做中抽或者小抽,根据个人经验,双手捏住大离心管顶端和底部,上下缓慢轻柔颠倒离心管。记住一定要将离心管颠倒来混匀。你说加完三液后用力才有沉淀,会不会是你在加二液的时候就么有混匀呢?我以往都是那么操作混匀的,效果都很好。

"轻柔的振荡"——不是动作温柔而幅度小。关于这个问题,我的分子生物学老师告诉我:“两手分别持离心管两端,使其水平(注意盖子要盖紧),靠左右手的捻动,使离心管自转,边转边使管子轮流向两恻有一定角度倾斜。转时要缓慢,而倾斜不要过于剧烈,看到管内呈现大量絮状物时才放置在冰上;待管内已分成絮状物与澄清的液体两层时即可离心。你的问题不是”很用力的激烈振荡,却有沉淀,”,而“很轻柔的振荡,没有沉淀”,而是轻柔的不够力度。你如果剧烈,“跑电泳还有结果”应该是偶然而不是必然。我这样提了N次,毫无问题。