内参Ct值比目的基因Ct值还要高？
1. Ct值在12～32之间均可；
2. Ct值由基因丰度和cDNA稀释倍数决定；
3. 设NTC排除基因组污染，或RNA用Dnase处理，或使用跨内含子引物；
4. 测RNA时OD值影响因素很多，如果整个上样液都用DEPC水，A260/A280大于1.6是可以接受的（1.5的也做得出！）；A260/A230当然*好大于2.0。特别注意到是上样稀释不要太稀，单个OD值（尤其是A260）小于0.1（不同等机器不同，我们这里用的eppendof的）结果不可靠，这个影响对A260/A280的影响似乎更大！当然你不放心*好再纯化一下：）