ELISA试剂盒各种样本的处理方法
血清 血清是*常用于ELISA检查的一类样本,处理也比较简略。 将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。避免运用溶血或高血脂的标本。 常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检查时还应仔细阅览试剂盒说明书,检查试剂盒是不是对抗凝剂有特殊要求。 用无热原、无内**的试管或离心管搜集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃放置一晚,使血清分出。 4℃ 1000×g离心20分钟,仔细搜集上清。 一同也应避免**污染,因为菌体内可能富含内源性的HRP然后致使检查的假阳性。 一般我们可用于ELISA检查的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不一样类型的检查样本前期的处理方法是不一样的。 ELISA试剂盒血浆 用含抗凝剂的采血管或离心管搜集血液标本,标本搜集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。 为了保证检查的**性,保存于-20℃或-80℃的样本*好在1~6个月内检查; 4℃保存的样本应在1周内进行检查。其他,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,然后致使假阴性的作用。 细胞培养上清 取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。 尿液、唾液等其他液体生物样本 1000×g离心20min,取上清即可检查。 ELISA试验成功的条件是样本的**处理加上试验途中**的操作,**的处理样本是保证ELISA检查的**性和**性的**步。 总的来说,因为ELISA只能检查可溶性蛋白的含量,所以应保证全部样本均为弄清的液体,堆积或悬浮物都应离心去掉。 主张将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免重复冻融。 ELISA试剂盒采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会开释具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为符号的ELISA检查中会有非特异性的显色,而致使检查的不**性。