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ELISA试剂盒样本与实验的重要性

ELISA试剂盒样本与实验的重要性

ELISA试剂盒即酶联**吸附法，是一种常用的固相酶**测定方法。因为ELISA方法简略，便当，活络，特异性强且不需求特别设备（只需求酶标仪就可以），所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
但是影响ELISA测定的要素有许多，而其操作中需求有一定的技术请求，如操作方法，环境，样本等，有时常可见到一些过错效果（即假阳性或假阴性）等，样本的重要性关系到全部实验的效果，上海极威生物为我们解读ELISA查看的影响要素之一-样本的影响
1、ELISA试剂盒样本的保存：在冰箱中保存过久的标本，在间接法ELISA测定中会致使本底过深、会构成假阳性；为避免上述问题，在测定血清标本时*佳能新鲜搜集；假如不能当即测定，根据相应的时间保存相应的温度，5 d内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应-20℃低温冻存；如冻存后融解的标本，蛋白质有些浓缩，分布不均，应充沛混合后再测定，但混匀时应轻柔，不可激烈振荡。
2、样本的时间：因为塑料试管能吸附抗原物质，所以样本长时间放在塑料管内会使样本内抗原含量下降构成假阴性。*佳的方法是运用真空采血管；并运用非抗凝标本，肝素抗凝血浆会增加OD值，EDTA、酶抑制剂（如NaN3）可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。
3、样本受**污染：因菌体中可能会含有内源性辣根过氧化物酶，因此，被**污染的标本同溶血标本相同，可能会发作非特异性显色而搅扰测定效果。
4、ELISA试剂盒样本的凝聚：样本凝聚不全。在实验中，有的时分心急为了争取时间快速查看，在血液还未初步凝聚的时分就强行离心分别血清，致使血清中仍残留有些纤维蛋白原，在ELISA测定过程中构成肉眼可见的纤维蛋白块，易构成假阳性效果；因此血液标本搜集后有必要使其充沛凝聚后再分别血清。
5、ELISA试剂盒样本溶血：溶血标本及混有红细胞的血清选用ELISA法查看易发作假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质（红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素），在洗刷过程中往往难以完全洗脱，它可使H2O2释放出原生态氧（O），然后催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质，即显蓝色，发作假阳性［2］。所以严峻溶血标本禁用。

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