脑动脉平滑肌细胞
规格： 5*10 5
细胞介绍
血管**发生和发展的一个主要因素是由于血管平滑肌细胞（smooth muscle cells, SMCs）转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应，并进一步造成血管**的原因 。因此，对血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管**的靶向**方法。
脑动脉平滑肌细胞细胞特性
1）来源：1-3天SD大鼠脑动脉
2）含量：>5x105 个/mL
3）鉴定：α-smooth muscle actin（α-SMA）特异性抗体**荧光法（见图片1）
4）纯度：>90%
5）污染：支原体、**、酵母和**检测为阴性
6）规格：1mL冻存管包装
运输和保存：干冰运输，收到后立即液氮冻存。
细胞使用：仅供科研使用。
脑动脉平滑肌细胞细胞培养步骤
1）准备完全培养基：传代和复苏的第1天，用DMEM培养基(GIBCO，货号11995-065)，90%；胎牛血清，20%，P/S。以后换液时，用DMEM培养基(GIBCO，货号11995-065)，90%；胎牛血清，10%，P/S。
2）培养瓶包被：在T-75细胞培养瓶中加入10mL无菌去离子水，然后加入15μL 10mg/mL的Poly-L-Lysine溶液（推荐2μg/cm2包被浓度），在370C培养箱中反应过夜（或至少一小时）。
3）用无菌去离子水洗涤两遍包被好的培养瓶，加入15mL完全培养基待用。
4）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在370C水浴中迅速振荡解冻，加入4mL 完全培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养液后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含有15mL完全培养基的培养瓶中隔夜贴壁培养。**天换液并检查细胞密度。
5）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，既可进行传代培养：
脑动脉平滑肌细胞1.弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，放于37℃培养箱中反应1-2分钟，然后在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL完全培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含10mL完全培养基的Poly-L-Lysine包被的培养瓶中。
脑动脉平滑肌细胞注意事项： 1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。 2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物**台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。