柱式血液RNAout
柱式血液RNAout低于1.7,考虑RNA降解,*常见的原因是RNA酶去除不彻底。
建议你1.EP管和tip用DEPC水泡,如果来不及也可以买现成的。
2.提取时注意低温,防止RNA降解。
3.洗涤用的75%酒精用DEPC水配制,*后融解RNA的水也应是DEPC水,或去RNA酶水。
4.提取的RNA尽快转录成cDNA,-70度保存时间不宜过长(一般不超过一个月)。
柱式血液RNAout提RNA提取秘诀:
1.提取RNA过程应该尽量快,不要太过仔细,以减少RNA的降解
2.在吸取上清液时要小心,离心管尽量不要抖动和倾斜,保持其从离心机里拿出来的角度吸取,加入异丙醇的那一步要尤其小心,上清液不要贪多
3.柱式血液RNAout干燥时不要太过
4.你跑的电泳是不是普通的琼脂糖凝胶电泳?这个结果不是很准确,因为在跑胶的过程当中RNA也会降解,但并不一定你提取的RNA效果不好,一般情况下跑出来的电泳结果有3条带,2000bp,1000bp,100多的位置各有一条带,分别是28s,18s,5s,如果5S很亮,表示RNA降解
5.提完的RNA可以做反转录,柱式血液RNAout然后用管家基因检测,只要能扩出明亮的条带即对你的实验没有影响。注意:在用管家基因检测时应增加循环数,以检测是否有DNA污染。
PAGE上样液1mLXY100912长效期SDS-PAGE电泳液(干粉)20L(A)XY81205一站式Tricine-SDS-PAGE套装30次XY81225Tricine-SDS-PAGE配胶液250mL|1000mLXY81213Tricine-SDS-PAGE上样液1mL|5mLXY81214Tricine-SDS-PAGE阳极电泳液(干粉)10L|50LXY81226Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液(干粉)10L|50LXY81212一站式蛋白非变性PAGE套装30次(A)|30次(B)|30次(C)XY100828高pH缓冲液套装30次XY100829中pH缓冲液套装30次XY100830低pH缓冲液套装30次XY70102蛋白质电泳分子量标准15次(A)|20次(B)|10次(C)XY70704预染蛋白质电泳分子量标准10次(A)|10次(B)XY90402蛋白胶微量回收试剂盒50次XY90403蛋白胶中量回收试剂盒5次XY80812考马斯亮蓝染液250mLXY61204一步式PAGE染液10次XY111203绿如蓝蛋白染液250次XY100810超快蛋白银染试剂盒1000mLXY100811质谱兼容型蛋白银染试剂盒10次XY100603银染**剂30次XY81215一站式Western印迹套装(显色法)20次(A)|20次(B)XY131104Western 封堵液500mLXY131105酪蛋白封堵液100mL(A)|100mL(B)XY131236牛血清白蛋白封堵液250mLXY131109Tris 缓冲盐溶液(TBS)10包XY131112氯萘酚溶液50mLXY131114ABTS 溶液50mlXY131115OPD 干粉25gXY131116pNPP 干粉1gXY131108ONPG 干粉1gXY101122尼龙膜1张XY101123PVDF膜1张XY81206氨基黑染膜液250mLXY100924丽春红S染膜液250mLXY100928湿法电转液(干粉)20LXY81207半干法电转液(干粉)20LXY100878Western印迹膜封膜液100mLXY81208印迹膜抗体稀释液100mLXY80813Western印迹膜抗体**剂50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑蓝250mgXY81224BCIP/NBT显色试剂盒100mLXY100214预混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增强型DAB显色试剂盒100mLXY101106沉淀型TMB显色试剂盒100mLXY91101一管式 TMB 显色液100mL(A)XY120201超敏化学发光(HRP)检测试剂盒25mL|250mLXY131192超敏化学发光(AP)检测试剂盒25mLXY131142鲁米诺1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 稳定剂/ 稀释剂200mLXY130565β-Actin小鼠单抗30μLXY130566α-Actin小鼠单抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠单抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠单抗30μLXY130569GAPDH小鼠单抗30μLXY130570植物Actin小鼠单抗30μLXY130571组蛋白3.1小鼠单抗30μLXY130572COX IV兔单抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc),碱性磷酸酶标记100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131148驴抗山羊IgG,碱性磷酸酶标记60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131152兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记300μLXY131153驴抗山羊IgG,辣根过氧化物酶标记60μLXY131154山羊抗小鼠IgG,荧光素488标记0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG,荧光素555标记0.1mgXY131156山羊抗兔IgG,异硫氰酸荧光素标记0.1mgXY131157藻红蛋白标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131158荧光素488标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131159荧光素555标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131160异硫氰酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG,藻红蛋白标记0.1mgXY100841β-巯基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,电泳级)100mLXY90311电泳级Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白样品处理试剂盒500次