Ethanol技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Ethanol这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Ethanol根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Ethanol以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Ethanol客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY3101 EASYspin 石蜡包埋组织microRNA快速提取试剂盒 50次 XY0201 质粒小量快速提取试剂盒(离心柱型) 50次/100次/200次 XY0301 高纯度质粒小量快速提取试剂盒(离心柱型) 50次/100次/200次 XY0401 无内**高纯度质粒小量快速提取试剂盒(离心柱型) 20次/50次 XY0601 酵母高纯度质粒小量快速提取试剂盒 50次 XY0801 中量质粒提取试剂盒(溶液型,无内**,转染级) 20次/40次 XY1001 无内**高纯质粒小提中量提取试剂剂盒(离心柱型) 50次 XY1101 质粒大量提取试剂盒(离心柱型) 10次 XY1201 高纯度质粒大量快速提取试剂盒(离心柱型) 10次 XY1301 无内**高纯度质粒大量快速提取试剂盒(离心柱型) 10次 XY1401 大型/大量质粒提取试剂盒(溶液型,转染级) 20次 XY2001 BAC/PAC大型质粒提取试剂盒(溶液型,转染级) 20次 XY0101 琼脂糖凝胶纯化回收试剂盒 50次/100次/200次 XY0201 PCR产物纯化回收试剂盒 50次/100次/200次 XY0301 多功能DNA纯化回收试剂盒 50次/100次/200次 XY3101 凝固全血基因组DNA提取系统 160次×50μl/320次×50μl XY0101 小量全血基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型) 50次/100次/200次 XY0201 小量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型) 50次×0.3ml/100次×0.3ml/200次×0.3ml XY0301 中量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型) 20次×3ml/50次×3ml XY0401 大量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型) 16次×10ml/32次×10ml/96次×10ml XY0501 中量/大量全血基因组DNA快速提取试剂盒(离心柱型) 10次×10ml XY0701 组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒 50次/100次/200次 XY0801 组织/细胞基因组DNA提取试剂盒(溶液型) 50次/100次/200次