oluene技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Toluene这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环，PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Toluene根据客户的实验目的，进行PCR反应的优化。
1、变性：高温使双链DNA解离形成单链（94℃，30s）。
2、退火：低温下，引物与模板DNA互补区结合（55℃，30s）。
3、延伸：中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应（70～72℃，30～60s）。
Toluene以上述三个步骤为一个循环，每一循环的产物均可作为下一个循环的模板，经过n次循环后，目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板（质粒、基因组DNA、PCR产物等），或者提供样品，我们制备模板。
2、引物设计
Toluene客户提供上、下游引物，或者提供目的基因的相关信息（基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等），我公司提供免费的引物设计及合成。XY4001 病毒基因组DNA快速提取试剂盒 50次 XY2501 微量/临床样品基因组DNA快速提取试剂盒 50次 XY3001 口腔/咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒 50次 XY2601 DNAzol 基因组DNA快速提取试剂 50ml/100ml XY3201 石蜡包埋组织DNA快速提取试剂盒 50次/100次 XY3601 尿液基因组DNA快速提取试剂盒 50次 XY3701 海洋动物组织基因组DNA快速提取试剂盒 50次/100次 XY4201 蛋白酶K 100mg XY3301 2 x SYBR Green qPCR Mix (Sybr green荧光染料法定量PCR) 50次×50μl/200次×50μl XY3901 2 x Real Time PCR Mix (Probe荧光探针法定量PCR) 40次×50μl/200次×50μl XY3601 TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit (两步法荧光定量反转录PCR试剂盒) 25次×50μl/50次×50μl XY4601 THERMOscript SYBR Green qRT-PCR Kit(两步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒) 25次×50μl/50次×50μl XY4101 TUREscript One Step qRT-PCR Kit (一步法荧光定量反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl XY4201 THERMOscript One Step qRT-PCR Kit(一步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl XY3501 快速植物DNA提取扩增套装 50次/100次/200次 XY1701 TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(反转录酶) 5000U/10000U/10000U×5 XY4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶) 5000U/10000U XY1801 TUREscript 1st Strand cDNA (**链反转录试剂盒) 25次/50次 XY4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(**链耐热反转录试剂盒) 25次/50次