Xylene(二甲苯)技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Xylene(二甲苯)这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Xylene(二甲苯)根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Xylene(二甲苯)以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Xylene(二甲苯)客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。抗HPC4标签蛋白单抗100μLXY130591小鼠抗SUMO标签蛋白单抗100μLXY130592HRP标记内参抗体30μLXY131202即用型GFP标签蛋白裂解液100uLXY130413肝素琼脂糖5mL|50mLXY130417蓝胶琼脂糖5mL|50mLXY130421DEAE交换介质50mLXY130423Q交换介质50mLXY130422CM交换介质50mLXY130424SP交换介质50mLXY131020Sephacryl S-400基质10mLXY130425苯基介质50mLXY130426丁基介质50mLXY130427丁基硫介质50mLXY130418Protein A琼脂糖1mLXY130420Protein G琼脂糖1mLXY131201Protein A+G琼脂糖2mLXY100939福林酚试剂100mLXY90610卵白蛋白标准品1mLXY131070牛血清白蛋白标准品1mLXY131071牛血清γ 球蛋白标准品1mLXY131072预稀释BSA 蛋白标准品1mLXY131220预稀释BGG 蛋白标准品1mLXY131074SDS-PAGE 样品预处理试剂盒50次XY131122考马斯亮蓝R-25010gXY131123考马斯亮蓝G-25010gXY131078天然蛋白A1mgXY131079重组蛋白A1mgXY131080重组蛋白G1mgXY131081重组蛋白A/G1mgXY131082重组蛋白L1mgXY131075糖蛋白染色试剂盒10次XY131076磷酸蛋白染色试剂盒10次XY131077组氨酸标签蛋白染色试剂盒10次XY80814Bradford法蛋白定量试剂盒100mL|200mLXY80815BCA法蛋白定量试剂盒500次XY80816超敏型BCA法蛋白定量试剂盒500次XY131069还原剂兼容型BCA蛋白定量试剂盒250次XY101102改良Lowry法蛋白定量试剂盒1000次XY80808蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mLXY80809蛋白磷酸酶抑制剂混合液11mLXY130525蛋白磷酸酶抑制剂混合液25mLXY130526**专用蛋白酶抑制剂10mLXY130527哺乳动物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130528植物专用蛋白酶抑制剂1mLXY130529酵母专用蛋白酶抑制剂5mLXY130530His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mLXY130531组织培养专用蛋白酶抑制剂1mLXY130543α2巨球蛋白25Inh.UXY130544AEBSF溶液5mLXY130534抗凝血酶Ⅲ溶液1mLXY130535APMSF溶液1mLXY100834胰蛋白酶抑制剂溶液10mLXY130536抑氨肽酶溶液5mLXY130537钙蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液10mLXY100538钙蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液10mLXY100539胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液1mLXY130540二氯异香豆素溶液10mLXY130541E-64蛋白酶抑制剂溶液10mLXY100837EDTA溶液,0.5M,蛋白级10mLXY130532EGTA溶液10mLXY130542水蛭素溶液2000ATUXY100836亮抑蛋白酶肽溶液1mLXY130533木瓜蛋白酶抑制剂溶液10mLXY100835胃蛋白酶抑制剂溶液1mLXY130545膦酰二肽溶液10mLXY100833PMSF溶液