Gelatins技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Gelatins这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Gelatins根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Gelatins以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Gelatins客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。100mLXY80813Western印迹膜抗体**剂50mL|200mLXY1008315-溴-4-氯-3-吲哚磷酸100mgXY100832四氮唑蓝250mgXY81224BCIP/NBT显色试剂盒100mLXY100214预混型BCIP/NBT溶液100mLXY81223增强型DAB显色试剂盒100mLXY101106沉淀型TMB显色试剂盒100mLXY91101一管式 TMB 显色液100mL(A)XY120201超敏化学发光(HRP)检测试剂盒25mL|250mLXY131192超敏化学发光(AP)检测试剂盒25mLXY131142鲁米诺1gXY131143AMPPD100mgXY131118乙烯乙二醇200mLXY131119HRP 稳定剂/ 稀释剂200mLXY130565β-Actin小鼠单抗30μLXY130566α-Actin小鼠单抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠单抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠单抗30μLXY130569GAPDH小鼠单抗30μLXY130570植物Actin小鼠单抗30μLXY130571组蛋白3.1小鼠单抗30μLXY130572COX IV兔单抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc),碱性磷酸酶标记100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记100μLXY131148驴抗山羊IgG,碱性磷酸酶标记60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记300μLXY131152兔抗鸡IgY,辣根过氧化物酶标记300μLXY131153驴抗山羊IgG,辣根过氧化物酶标记60μLXY131154山羊抗小鼠IgG,荧光素488标记0.1mgXY131155山羊抗小鼠IgG,荧光素555标记0.1mgXY131156山羊抗兔IgG,异硫氰酸荧光素标记0.1mgXY131157藻红蛋白标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131158荧光素488标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131159荧光素555标记山羊抗兔IgG0.1mgXY131160异硫氰酸荧光素标记山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG,藻红蛋白标记0.1mgXY100841β-巯基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,电泳级)100mLXY90311电泳级Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白样品处理试剂盒500次 工具酶