Paraffin技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Paraffin这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Paraffin根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Paraffin以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Paraffin客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY51206Taq DNA聚合酶500U|5000UXY120401热启动Taq DNA聚合酶100UXY130606抗干扰Taq DNA 聚合酶100次XY130910Long-Taq DNA聚合酶500UXY90501Tth DNA聚合酶250UXY51207Pfu DNA聚合酶100UXY130429Phusion DNA聚合酶250UXY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250UXY120411T4 DNA 聚合酶50UXY130618T7 DNA 聚合酶(未修饰)300UXY130602Vent DNA 聚合酶100UXY131195Deep Vent DNA 聚合酶100UXY131182Sulfolobus DNA 聚合酶 IV100UXY130612Bst DNA 聚合酶,全长500UXY100209Bst DNA聚合酶,大片段800UXY130616Bsu DNA 聚合酶,大片段200UXY1306139°Nm DNA聚合酶200UXY130614Therminator DNA 聚合酶200UXY131196Therminator II DNA 聚合酶100UXY130617Therminator γ DNA 聚合酶200UXY60905MMLV逆转录酶10000U|50000UXY131209MMLV逆转录酶(H-)1000UXY131210耐热型MMLV逆转录酶(H-)1000UXY90502AMV逆转录酶200UXY120312末端脱氧核苷转移酶500UXY120509Poly(A)聚合酶20UXY130620Poly(U)聚合酶60UXY131124多核苷酸磷酸化酶100mgXY120307SP6 RNA聚合酶1000U|5000UXY120310T7 RNA聚合酶1000U|25000UXY120309T3 RNA聚合酶1000U|10000UXY130641T4 核酸内切酶 V2000UXY130643烷基腺嘌呤DNA糖基化酶500UXY1306458-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶80UXY130646尿嘧啶-DNA糖基化酶500UXY130647尿嘧啶糖基化酶抑制剂200UXY130648Afu 尿嘧啶-DNA 糖基化酶200UXY130666尿嘧啶切刻酶50UXY130649人单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶500UXY120505Dam 甲基转移酶500UXY120511CpG 甲基转移酶(M.SssI)100UXY130653GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)200UXY120506T4聚核苷酸激酶200UXY130655热敏磷酸酶500UXY130552碱性磷酸酶,偶联级500UXY131125辣根过氧化物酶,偶联级100mgXY120405碱性磷酸酶,大肠杆菌25UXY120404碱性磷酸酶,牛小肠500UXY120403虾碱性磷酸酶300UXY130657无机焦磷酸酶,热稳定250UXY130658无机焦磷酸酶 (酵母)10UXY130659三磷酸腺苷双磷酸酶10000milliUXY130660ATP硫酸化酶10UXY120419大肠杆菌DNA连接酶1000UXY60609T4 DNA连接酶200UXY130621Taq DNA 连接酶1000UXY1306249°N DNA 连接酶2500UXY120421T4 RNA连接酶1000UXY130622T4 RNA连接酶 11000UXY130855T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )150UXY130856T4 RNA 连接酶 2(截短型 )2000UXY130857T4 RNA 连接酶 2 (截短型 K227Q)2000UXY120510ATP依赖的Dnase200UXY131230DNase I干粉100mgXY130984DNase I溶液1.5mLXY90205RNase A干粉100mg|500mgXY3160RNase A溶液1.5mLXY120409BAL 31核酸酶50UXY101001Benzonase核酸酶500UXY130824冷启动核酸酶10000UXY120407S1核酸酶5000UXY120408绿豆核酸酶1000UXY120412微球菌核酸酶5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸内切酶 III500UXY130638核酸内切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸内切酶 IV500UXY130640核酸内切酶 V250UXY130639核酸内