APES-丙酮包被液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。APES-丙酮包被液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
APES-丙酮包被液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
APES-丙酮包被液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
APES-丙酮包被液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸内切酶 III500UXY130638核酸内切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸内切酶 IV500UXY130640核酸内切酶 V250UXY130639核酸内切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸内切酶 VIII1000UXY130635T7核酸内切酶 I250UXY130634人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶1000UXY120410核酸外切酶 I750UXY120420核酸外切酶 III2500UXY130627核酸外切酶 T250UXY130628Lambda 核酸外切酶1000UXY130629RecJf 核酸外切酶1000UXY130632T7 核酸外切酶1000UXY130672核糖核酸酶RNase If10000UXY120414DNA 拓扑异构酶 I100UXY130651DNA 促旋酶(E. coli )100UXY130665Cre 重组酶50UXY81106蛋白酶K干粉100mgXY80911蛋白酶K溶液1.5mLXY131025胰凝乳蛋白酶,测序级25μgXY131026弹性蛋白酶5mgXY120508肠激酶(轻链)0.032μg|0.063μgXY120507Xa因子蛋白酶25μg|50μgXY130867Furin 蛋白酶50UXY131027胃蛋白酶250mgXY130876PreScissiom 蛋白酶100UXY130872SUMO 蛋白酶5μgXY130875葡激酶100μgXY131183链激酶100μgXY130873TEV蛋白酶300UXY120708凝血酶1000UXY131028嗜热菌蛋白酶25mgXY131029胰蛋白酶,质谱级100μgXY130868人二硫键异构酶1mgXY130869人超氧化物歧化酶10kuXY120623β-琼脂糖酶Ⅰ100U|500UXY100406溶菌酶干粉10gXY100815溶菌酶溶液1.5mLXY131017乙酰化牛血清白蛋白400μLXY130874人玻连蛋白100μgXY130870硫氧还蛋白5mgXY131021链霉亲和素1mgXY130818HRP标记链霉亲和素0.1mLXY131022碱性磷酸酶标记链霉亲和素0.5mLXY131085亲和素10mgXY131086HRP标记亲和素2mgXY131087碱性磷酸酶标记亲和素100mgXY131088荧光素(FITC)标记亲和素5mgXY131090中性亲和素蛋白10mgXY131092生物素1gXY131093荧光素标记的生物素5mgXY131094生物素化的牛血清白蛋白25mgXY131095生物素化的辣根过氧化物酶5mgXY131096生物素化的碱性磷酸酶(AP)1mgXY131098生物素化蛋白G0.5mgXY131099生物素化蛋白A1mgXY131101生物素化蛋白L0.5mgXY131102生物素化兔IgG5mgXY130661RecA蛋白200μg|1000μgXY130662Tth RecA 蛋白100μgXY130663T4 噬菌体基因 32 蛋白100μg|500μgXY130664极高热稳定单链结合蛋白50μg