多聚赖氨酸包被液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。多聚赖氨酸包被液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
多聚赖氨酸包被液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
多聚赖氨酸包被液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
多聚赖氨酸包被液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。核酸电泳及回收 XY60904一站式RNA电泳套装10次XY90317一站式DNA尿素-PAGE电泳套装30次XY70606一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装30次XY100205一站式DNA非变性PAGE电泳套装30次XY51210超快核酸电泳液干粉20L|50LXY100211TAE电泳液,50×250mL|2500mLXY90313TBE电泳液,10×250mL|2500mLXY100816碱性胶电泳液,10×250mLXY3150RNA电泳液,10×100mL|250mLXY3690DNA上样液,6×10mL(A)|10mL(B)XY3130三合一RNA上样液1.5mL(A)|1.5mL(B)XY101222DNA碱性胶上样液1.5mL|10mLXY70608miRNA尿素-PAGE上样液1.5mL|10mLXY100874DNA尿素-PAGE上样液1.5mL|10mLXY100875DNA 非变性PAGE上样液1.5mL|10mLXY3280SYBR GreenⅠ,电泳级50μLXY61201耐热型SYBR染料,电泳级50μLXY70303绿如蓝核酸染料(UV型)0.5mL|1.5mLXY121002绿如蓝核酸染料(可见光型)10mLXY81104超快核酸银染试剂盒1000mLXY100808溴化乙锭干粉1gXY3180溴化乙锭溶液1.5mLXY3092溴化乙锭**剂100次XY70503DNA电泳分子量标准50次XY111107DNA电泳分子量标准(2)50次XY90602DNA电泳分子量标准(3)50次XY120654Southern专用DNA Marker20次(A)|20次(B)XY90101大片段DNA分子量标准50μgXY130960超螺旋DNA分子量标准100uLXY70605miRNA电泳分子量标准30次XY3120微量RNA助沉剂0.1mLXY131187Acryl DNA助沉剂1mLXY131188彩色Acryl DNA助沉剂1gXY131189分子生物学级糖原干粉1gXY131190分子生物学级糖原溶液1mLXY50903微量核酸沉淀剂10mLXY60402超快非醇核酸沉淀剂30次|100次XY110801核酸浓缩剂30mLXY80204柱式RNA纯化试剂盒50次XY90211低载量PCR片段纯化试剂盒50次|100次XY90212高载量PCR片段纯化试剂盒50次|100次XY100201海量PCR片段纯化试剂盒5次XY8091996孔板PCR片段纯化回收试剂盒(离心法)1次|5次XY60202柱式DNA胶回收试剂盒50次|100次XY90506胶回收及PCR片段纯化两用试剂盒50次|100次XY60706一管式DNA胶回收试剂30次|100次XY60601DNA UV防护剂3gXY70908DNA PAGE胶回收试剂盒30次|100次XY80202柱式DNA PAGE胶回收试盒50次XY80401柱式OLIGO回收试剂盒50次XY70604miRNA PAGE胶回收试剂盒40次XY80203柱式miRNA PAGE胶回收试剂盒50次XY81105琼脂糖100gXY130835低熔点琼脂糖2.5g|5gXY100864丙烯酰胺溶液(干粉型)200mLXY100877甲叉双丙烯酰胺25gXY100880四甲基乙二胺1.5mLXY100879过硫酸铵0.1g×10XY100873尿素100gXY100933MOPS(电泳级)100gXY80935剥离硅烷50mLXY90308亲和硅烷25mLXY90503电泳级甘油100mLXY100934电泳级二甲苯蓝FF溶液10mLXY100882电泳级溴酚蓝溶液10mLXY100948电泳级橙黄G溶液10mLXY130965PAGE胶长加样枪头1盒XY130966水饱和正丁醇10mLXY130967预混型丙烯酰胺-甲叉双丙烯干粉(19:1)100gXY130968预混型丙烯酰胺-甲叉双丙烯干粉(29:1)100g 核酸扩增(PCR)