铬矾明胶包被液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。铬矾明胶包被液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
铬矾明胶包被液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
铬矾明胶包被液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
铬矾明胶包被液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY100844PCR优化试剂盒1套XY90302氯化锰溶液,PCR级5mLXY70905明胶溶液,2%,PCR级1.5mLXY61203高GC DNA**剂,PCR级1.5mLXY130307二氯化锰溶液,25mM,PCR级5mLXY130840硫酸镁溶液,10mM,PCR级5mLXY130841石蜡油,PCR级10mLXY80205DMSO,PCR级1.5mLXY130506海藻糖溶液,1.5M,PCR级1.5mLXY70902甜菜碱溶液,5M,PCR级1.5mLXY70909绿如蓝染料,PCR级0.1mL|1mLXY51208dNTP溶液,10 mM0.5mL(B)|5mL(B)XY131038dUTP溶液,100 mM0.4mLXY130920dITP溶液,100mM0.5mLXY120615dATP溶液,100mM0.5mLXY120617dTTP溶液,100mM0.5mLXY120619dGTP溶液,100mM0.5mLXY130917dCTP溶液,100mM0.5mLXY131139Deaza dGTP溶液,5mM0.4mLXY131140双脱氧dNTP溶液,10mM40uL×4XY131141dNTP和引物**剂100次XY131212PCR Mix染料10mLXY60901可逆型Taq DNA聚合酶抑制剂0.3mLXY130815Taq酶抗体250U|1000UXY130601DNA 修复混合液30次|150次XY70802即用型PCR试剂盒2.0100次|600次XY90805即用型PCR试剂盒3.0100次|600次XY130986即用型热启动PCR 试剂盒1.5次XY130985免DNA提取PCR试剂盒100次XY101005即用型易错PCR试剂盒100次XY90702即用型长片段PCR试剂盒20次XY90708即用型高保真PCR试剂盒1.5mL|9mLXY130605即用型多重 PCR试剂盒50次XY90408即用型荧光定量PCR试剂盒100次|600次XY130816Real-Time PCR稀释液1mlXY130817ROX参考染料,高浓度型200μlXY100931ROX参考染料,低浓度型5μgXY60906cDNA**链合成试剂盒10次|50次XY130911miRNA cDNA**链合成试剂盒25次XY131042miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒25次XY131005cDNA**链合成试剂盒30次XY130308一管式双链cDNA合成试剂盒10次XY100814Oligo dT12-18引物5μgXY1004096 nt随机引物5μgXY13122710 nt随机引物5μgXY1206796nt随机引物(抗水解)100μLXY80206两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)50次XY91202双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR试剂盒100次XY101219即用型荧光定量RT-PCR试剂盒50次XY100941通用型全基因组扩增试剂盒30次XY100938单细胞全基因组扩增试剂盒30次XY100940石蜡包埋组织全基因组扩增试剂盒30次XY100942单孢子全基因组扩增试剂盒30次XY100947环状DNA全基因组扩增试剂盒30次XY100203通用型LAMP试剂盒50次XY101114通用型RT-LAMP试剂盒50次XY130923LAMP扩增阳性对照50次XY130833LAMP可见光染料1mLXY131179核酸稀释液,测OD专用100mLXY131083Ribo-SPIA cDNA 扩增试剂盒20次XY91106T7体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY91107SP6体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY91108T3体外转录试剂盒50次(A)|50次(B)XY130694m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY130695m7G(5′)ppp(5′)A 帽结构类似物25ODXY130696G(5′)ppp(5′)A 帽结构类似物25ODXY130697G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY1306983′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25ODXY70906NTP溶液,10 mM0.5mLXY120625ATP溶液,100mM0.25mLXY120626UTP溶液,100mM0.25mLXY120628GTP溶液,100mM0.25mLXY120627CTP溶液,100mM0.25mLXY130832通用型MLPA试剂盒20次XY130551单细胞RNA扩增试剂盒80次XY130803单细胞裂解液(DNA)1mLXY130804单细胞裂解液(RNA)1mLXY130805单细胞悬浮液1mLXY130806胚胎裂解液1mLXY131128动物种属鉴定PCR Mix100次XY131129植物种属鉴定PCR Mix100次XY131130**种属鉴定PCR Mix100次XY131131**种属鉴定PCR Mix100次XY30常用PCR引物100uL 基因结构和功能