甲醛-明胶包被液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。甲醛-明胶包被液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
甲醛-明胶包被液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
甲醛-明胶包被液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
甲醛-明胶包被液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY100212 一管式点突变试剂盒 10次 XY130823 多点突变试剂盒 20次 XY100213 DNA嵌套缺失试剂盒 10次 XY100922 亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒 50次 XY130301 DNA甲基化修饰试剂盒 150次 XY130428 甲基化PCR 2.0试剂盒 150次 XY100923 甲基化专一性PCR试剂盒 50次 XY100936 人甲基化/非甲基化DNA标准品 100次 XY111009 端粒酶重复片段扩增试剂盒 50次 XY100204 一站式PCR-SSCP套装 1套 XY101003 RAPD PCR试剂盒(含银染) 100次 XY111109 DOP-PCR试剂盒 50次 XY130408 eTS抑制性差减杂交PCR试剂盒 10次 克隆及表达