Highman封固剂技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Highman封固剂这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Highman封固剂根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Highman封固剂以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Highman封固剂客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。100mLXY130898MAL指示剂培养基100mLXY130899GAL指示剂培养基100mLXY130901酵母生产及产孢培养基100mLXY130902酵母产孢培养基100mLXY120517零诱导培养基100mLXY120688放线菌酮溶液1mLXY120680放线菌素D溶液1mLXY120681可溶性两性霉素B溶液1mLXY60206氨苄青霉素溶液10mLXY60101氨苄青霉素干粉1gXY120682杆菌肽溶液1mLXY120704博莱霉素溶液1mLXY120683羧苄青霉素钠溶液1mLXY120684噻孢霉素溶液1mLXY120685先锋霉素溶液1mLXY60102氯霉素干粉1gXY60207氯霉素溶液10mLXY120687环孢霉素A溶液1mLXY120686细胞松弛素B溶液0.1mLXY131234地塞米松溶液1mLXY120690红霉素溶液10mLXY100838遗传霉素(G418)干粉100mgXY100839潮霉素B干粉250mgXY120692硫酸庆大霉素溶液2mLXY60208硫酸卡那霉素溶液10mLXY60302硫酸卡那霉素干粉1gXY120693丝裂霉素C溶液1mLXY60203硫酸新霉素干粉1gXY120695新生霉素溶液5mLXY120694制霉菌素溶液10mLXY120696土霉素盐酸盐溶液10mLXY120697青霉素G钾盐溶液1MuXY120698青霉素G钠盐溶10mLXY120699多粘菌素 B 硫酸盐5mLXY100840嘌呤霉素干粉25mgXY120700利福平溶液10mLXY131232壮观霉素溶液10mLXY120701链脲佐菌素溶液10mLXY60210硫酸链霉素溶液10mLXY60209盐酸四环素溶液10mLXY120702衣霉素溶液1mLXY60301盐酸四环素干粉1gXY120703盐酸万古霉素溶液10mL 探针标记及检测