Flemming固定液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。Flemming固定液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
Flemming固定液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
Flemming固定液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
Flemming固定液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY059 肠产毒性大肠杆菌(ETEC)耐热肠**(ST-elt)核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY060 肠产毒性大肠杆菌(ETEC)耐热肠**(ST-est)核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY061 肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY062 肠致病性大肠杆菌(EPEC)核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY063 肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY064 幽门螺旋杆菌(HP)核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY065 坂崎肠杆菌核酸荧光PCR检测试剂盒 48 XY066 沙门菌/志贺菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY067 副溶血性弧菌/霍乱弧菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY068 嗜水气单胞菌/类致贺邻单胞菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY069 小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY070 空肠弯曲菌/结肠弯曲菌核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY071 副溶血性弧菌TDH/TLH核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY072 副溶血性弧菌TOXR/TRH核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48 XY073 霍乱弧菌O139/O1核酸双色荧光PCR检测试剂盒 48