多聚甲醛-磷酸缓冲固定液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。多聚甲醛-磷酸缓冲固定液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
多聚甲醛-磷酸缓冲固定液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
多聚甲醛-磷酸缓冲固定液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
多聚甲醛-磷酸缓冲固定液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY880603 微型离心管专用研磨杵 50只(A)|50套(B) XY83670 动物DNAOUT 100mL|250mL XY871206 柱式动物DNAOUT 50次 XY8130433 磁珠动物DNAOUT 50次 XY8120655 Southern级动物DNAOUT 5次 XY880923 大提柱式动物DNAOUT 4次 XY8101111 柱式软体动物DNAOUT 50次 XY881101 柱式昆虫DNAOUT 50次 XY83671 血液DNAOUT 50次|150次 XY860306 柱式血液DNAOUT 50次|200次 XY8130509 磁珠血液DNAOUT 100次 XY8120522 柱式血液DNA-RNAOUT 50次 XY8120202 血液保存和DNA纯化套装 100次 XY880924 大提柱式血液DNAOUT 4次 XY880920 96孔板血液DNAOUT(离心法) 1次|5次 XY871002 凝固血液DNAOUT 30次|100次 XY871204 柱式凝固血液DNAOUT 50次 XY8120720 柱式冻存血液DNAOUT 50次|250次 XY880805 柱式毛发DNAOUT 50次 XY8111201 痰液DNAOUT 50次 XY891102 柱式骨骼DNAOUT 50次 XY880801 柱式拭子DNAOUT 50次 XY860501 一管式拭子DNAOUT 20次|100次 XY870502 石蜡包埋组织DNAOUT 30次