乙醇-甲醛固定液技术服务
一、实验原理
类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链,随之将反应混合物冷却至某一温度,这一温度可使引物与它的靶序列发生退火,再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。乙醇-甲醛固定液这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环,PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。
二、实验步骤
PCR扩增
乙醇-甲醛固定液根据客户的实验目的,进行PCR反应的优化。
1、变性:高温使双链DNA解离形成单链(94℃,30s)。
2、退火:低温下,引物与模板DNA互补区结合(55℃,30s)。
3、延伸:中温延伸。DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应(70~72℃,30~60s)。
乙醇-甲醛固定液以上述三个步骤为一个循环,每一循环的产物均可作为下一个循环的模板,经过n次循环后,目的DNA以2n的形式增加。
三、样品准备
1、模板制备
客户提供PCR所需模板(质粒、基因组DNA、PCR产物等),或者提供样品,我们制备模板。
2、引物设计
乙醇-甲醛固定液客户提供上、下游引物,或者提供目的基因的相关信息(基因序列、Genebank accession number扩增产物的用途等),我公司提供免费的引物设计及合成。XY8120501 柱式动物线粒体DNAOUT,测序级 15次 XY8130831 丝状**线粒体DNAOUT 15次 XY8120406 柱式植物叶绿体DNAOUT 10次 XY8101101 线状DNA**剂 30次 XY860707 **DNAOUT 50次|250次 XY860802 柱式**DNAOUT 50次(A)|50次(B) XY880927 大提柱式**DNAOUT 4次(A)|4次(B) XY860806 一步式**DNAOUT 50次 XY870702 分枝杆菌DNAOUT 50次 XY870703 柱式分枝杆菌DNAOUT 50次 XY860701 土壤DNAOUT 30次|100次 XY871205 柱式土壤DNAOUT 50次 XY880928 大提柱式土壤DNAOUT 4次 XY8101112 柱式水样DNAOUT 50次 XY83674 一管式病毒DNAOUT 50次|200次 XY870701 柱式病毒DNAOUT 50次 XY880921 96孔板病毒DNAOUT(离心法) 1次|5次 XY880101 一管式病毒DNA-RNAOUT 50次 XY870202 柱式酵母质粒DNAOUT 50次 XY890607 柱式BAC DNAOUT 50次 XY890608 中提柱式BAC DNAOUT 5次 XY860205 柱式质粒 DNAOUT 50次|100次