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产品资料

神经肽FF(NPFF)重组蛋白

神经肽FF(NPFF)重组蛋白
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  • 产品名称:神经肽FF(NPFF)重组蛋白
  • 产品型号:
  • 产品展商:I&C
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简单介绍
神经肽FF(NPFF)重组蛋白将目的基因连接在表达载体后,通过加入诱导剂IPTG诱导目的基因表达。表���载体除具有蛋白表达所需要的启动子外,在终止子前有6个His编码序列,便于蛋白的亲和层析纯化。神经肽FF(NPFF)重组蛋白Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,请参见活性蛋白。
产品描述

神经肽FF(NPFF)重组蛋白

来源: 原核表达

宿主:E.coli

内**水平:<1.0EU/µg(LAL法测定)

亚细胞定位:Secreted

预测分子量:15.7kDa

实际分子量:-(差异分析请参阅说明书)

片段与标签:Thr21~Pro152 (Accession # Q6ISS4) with N-terminal His Tag

缓冲液成份磷酸盐缓冲液:(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性状:冻干粉

纯度> 95%

等电点:5.5

应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.如果需要有生物活性的蛋白,请参见活性蛋白。   

规格:10µg 50µg 200µg 1mg 1g

神经肽FF(NPFF)重组蛋白实验步骤:

1.设计目的重组蛋白质的N端10-15个氨基酸的简并序列。

2.引物合成上述简并序列,同时设计合成目的基因反向引物。

3.PCR扩展目的基因,这样在目的基因的5‘端就引入了兼并序列,同时不改变氨基酸序列。

4.双酶切,插入到目标载体。

5.转化。

6.挑选多个克隆(比如100-200个)到1.5ml EP管,直接诱导表达(记得带上为改造克隆菌株的对照)。

7.SDS-PAGE检测。

8.挑选高表达的多个克隆,测序。

神经肽FF(NPFF)重组蛋白的表达策略优点和缺点

神经肽FF(NPFF)重组蛋白分离纯化原则总结:

1.应尽可能利用蛋白质不同物理特性选择所用的分离纯化技术,而不是利用相同技术多次纯化;

2.不同的蛋白在性质上有很大区别,每一步纯化步骤都应当充分利用目的蛋白和杂质成分物理性质差异;

3.在纯化早期阶段要尽量减少处理体积,方便后续纯化;

4.在纯化后期阶段,再使用造价高的纯化方法,有利于纯化材料的重复使用,减少再生复杂性。

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