尾型同源框转录因子2(CDX2)重组蛋白表达系统主要分原核表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞表达系统、哺乳动物细胞表达系统、转基因植物表达系统和转基因动物表达系统六大重组蛋白表达系统。
英文简称:2(CDX2) Recombinant protein
规格:10µg 50µg 200µg 1mg 1g
用法:PBS或其它。
储存:避免反复冻融。2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月。
稳定性:热稳定性以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定,具体方法如下:在37°C孵育48小时,没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内,在适当的条件下存储,损失率低于5%。
不同的系统步骤稍微有些不同的,大致步骤如下:
尾型同源框转录因子2(CDX2)重组蛋白真核表达系统的重组蛋白表达步骤: bv v bkjmkjm
a. 选择表达载体和宿主细胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表达载体的构建
c. 无内**的质粒抽提
d. 细胞瞬时转染
e. 表达小试,条件优化
f. 表达分析和鉴定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表达
h. 亲和纯化
i. 检测和鉴定
尾型同源框转录因子2(CDX2)重组蛋白原核表达系统的重组蛋白表达步骤:
a. 选择表达载体
b. 密码子优化
c. 基因合成/亚克隆
d. 转化表达菌株
e. 蛋白表达小试分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白亲和纯化
g. 如果蛋白不可溶,则需要变复性来制备可溶蛋白。
h. 鉴定,包括SDS-PAGE和WB鉴
尾型同源框转录因子2(CDX2)重组蛋白总之,各种表达系统各有优缺点,使用大肠杆菌表达系统能够在较短时间内获得表达产物,且所需的成本相对较低;但目的蛋白常以包涵体形式表达,产物纯化困难,且原核表达系统翻译后加工修饰体系不完善,表达产物的生物活性较低。酵母和昆虫细胞表达系统蛋白表达水平高,成本低,但翻译后加工修饰体系与哺乳动物不完全相同。哺乳动物表达系统产生的蛋白质更接近于天然状态,但表达量低,操作繁琐。因此,选择表达系统时,应充分考虑各种因素,如要表达蛋白的性质、生产成本、表达水平、**性、表达周期等。随着对外源基因表达系统研究的不断深入,随着更多表达机理和影响因素的发现,相信在不久的将来,原核与真核两种表达系统在重组蛋白的生产研究中仍然都会占有一席之地,并将出现更多更加完善的表达系统。
尾型同源框转录因子2(CDX2)重组蛋白系列产品列表: