中文名称:DNA指导聚合酶α1(POLα1)重组蛋白
英文名称:Recombinant Polymerase DNA Directed Alpha 1 (POLa1)
英文简称:POLA; p180; DNA polymerase alpha catalytic subunit p180
规格:10µg 50µg 200µg 1mg 1g
来源:原核表达
宿主:E.coli
怎么样构建含有标签的DNA指导聚合酶α1(POLα1)重组蛋白载体:
首先把表达标签载体选择好了,是HA还是FLAG、HIS还是EGFP等等,然后确定目的克隆蛋白编码DNA的来源,可以购买,也可以自己从基因组DNA中PCR之后就是要把两者接在一起,首先要根据表达载体选择酶切位点,之后把PCR产物酶切,然后纯化酶切产物,再用连接酶把载体和目前DNA连接起来,再纯化就可以了。
DNA指导聚合酶α1(POLα1)重组蛋白的组氨酸标签怎么去掉:
PET-32a的His tag分别在前面的trx蛋白C端以及你的目标蛋白C端,如果你的目的蛋白在构建载体的时候自己加了终止子,那么你的目的蛋白C端是没有His tag的,也就是说**一个his tag在trx与你的蛋白之间(PET32a是融合蛋白),这样,PET-32a提供的两个肽链内切酶(凝血酶和肠激酶)都是可以切掉的,当然,个人建议你用肠激酶,因为肠激酶酶切位点更贴近你的目的蛋白,而用凝血酶的话还有一个S tag。如果你在构建载体的时候,下游引物没有加终止子,那么你的蛋白的N端也会有一个His Tag,这时候你需要用TAGZyme了,这个酶专一性去除his tag的。
DNA指导聚合酶α1(POLα1)重组蛋白来源细胞和**有何区别:
1,古生菌的细胞壁是由多糖、糖蛋白和蛋白质组成的,*常见的细胞壁类型是类结晶表面层.真**G+的细胞壁主要含有肽聚糖,有的含有磷壁酸;G-含有稀疏的肽聚糖和脂多糖、蛋白和周质.
2,古生菌与真**在细胞膜成分上的主要不同如:磷脂的疏水尾由异戊二烯重复单位组成,亲水头(甘油)与疏水尾间通过醚键连接,细胞膜的侧链由不同的化合物构成,**和真核生物的酸没有这些侧分支。
DNA指导聚合酶α1(POLα1)重组蛋白相关蛋白列表: