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pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒
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pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒
产品资料
pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pTrcHis2A大���pTrc系列表达质粒是为高效重组蛋白表达和大肠杆菌纯化而设计的pbr322表达载体。使用trp(trp - lac)启动子(Egon et al .,1983)和rrnB反终止区域(Li et al .,1984)可能会有较高的表达水平。trc启动子包含trp启动子的- 35区域和lac启动子的- 10区域(Brosius et al .,1985;大多et al .,1983;穆里根et al .,1985)。pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒为了调节表达,在pTrcHis2载体中提供了编码Lac抑制因子(lacIq)的基因,允许对trc启动子进行调控,不管宿主菌株是否含有一个编码了Lac抑制因子的基因。
产品描述
pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒
产品信息
基本信息
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY1592
pTrcHis2A大肠pTrc系列表达质粒
1μg
¥请加QQ询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
Trc/lac promoter
复制子:
PBR322 ori
终止子:
rrnB TT
质粒大小:
4406bp
质粒标签:
C-Myc,C-6xHis
原核抗性:
氨苄青霉素Amp
克隆菌株:
大肠杆菌DH5α
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
大肠杆菌
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
pTrcHis-F: GAGGTATATATTAATGTATCG
3'测序引物:
pTrcHis-F: GAGGTATATATTAATGTATCG
备注:
pTrc表达质粒
质粒简介
pTrcHis2A质粒是一个大肠杆菌蛋白表达载体,Trc启动子驱动目的基因的表达。
The pTrcHis2 plasmids are pBR322-derived expression vectors designed for efficient recombinant protein expression and purification in E. coli. High levels of expression are possible using the trc (trp-lac) promoter (Egon et al., 1983) and the rrnB anti-termination region (Li et al., 1984). The trc promoter contains the –35 region of the trp promoter together with the –10 region of the lac promoter (Brosius et al., 1985; Egon et al., 1983; Mulligan et al., 1985). To regulate expression, the gene encoding Lac repressor (lacIq) is provided in the pTrcHis2 vectors, allowing regulation of the trc promoter regardless of whether the host strain contains a gene encoding the Lac repressor. Isopropyl-Beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG) is used to induce expression of your gene. Translation is enhanced by the bacteriophage T7 gene 10 translation enhancer and a minicistron that provides highly efficient translational restart into the open reading frame of the multiple cloning site. DNA inserts are positioned downstream and in frame with the initiation ATG and a C-terminal fusion peptide. The C-terminal peptide encodes the myc epitope and six histidine residues that function as a metal binding site in the expressed protein.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 4406 bp ds-DNA circular SYN 29-七月-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pTrcHis2A
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4406)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4406
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
misc_feature 193..222
/note="trc promoter"
/note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and
lac UV5 promoters"
protein_bind 230..246
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
misc_feature 263..332
/note="rrnG antiterminator"
/note="antiterminator from the E. coli rrnG leader region
(Berg et al., 1989)"
CDS 383..409
/codon_start=1
/product="synthetic cistron containing a ribosome binding
site (Shine-Dalgarno sequence), for enhancing the bacterial
expression of a downstream cistron (Schoner, 1997)"
/note="minicistron"
/note="This first cistron should terminate 3 bp upstream of
the ATG for the second cistron."
/translation="MYRLNKEE"
misc_feature 411..541
/note="MCS"
CDS 471..500
/codon_start=1
/product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
/note="Myc"
/translation="EQKLISEEDL"
CDS 516..533
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
terminator 759..845
/gene="Escherichia coli rrnB"
/note="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 937..964
/note="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 984..1075
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 1076..1936
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 2107..2695
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature 2881..3021
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
promoter 3207..3284
/gene="lacI (mutant)"
/note="lacIq promoter"
/note="In the lacIq allele, a single base change in the
promoter boosts expression of the lacI gene about 10-fold."
CDS 3285..4367
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPSTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
ORIGIN
1 gtttgacagc ttatcatcga ctgcacggtg caccaatgct tctggcgtca ggcagccatc
61 ggaagctgtg gtatggctgt gcaggtcgta aatcactgca taattcgtgt cgctcaaggc
121 gcactcccgt tctggataat gttttttgcg ccgacatcat aacggttctg gcaaatattc
181 tgaaatgagc tgttgacaat taatcatccg gctcgtataa tgtgtggaat tgtgagcgga
241 taacaatttc acacaggaaa cagcgccgct gagaaaaagc gaagcggcac tgctctttaa
301 caatttatca gacaatctgt gtgggcactc gaccggaatt atcgattaac tttattatta
361 aaaattaaag aggtatatat taatgtatcg attaaataag gaggaataaa ccatggatcc
421 gagctcgaga tctgcagctg gtaccatatg ggaattcgaa gcttgggccc gaacaaaaac
481 tcatctcaga agaggatctg aatagcgccg tcgaccatca tcatcatcat cattgagttt
541 aaacggtctc cagcttggct gttttggcgg atgagagaag attttcagcc tgatacagat
601 taaatcagaa cgcagaagcg gtctgataaa acagaatttg cctggcggca gtagcgcggt
661 ggtcccacct gaccccatgc cgaactcaga agtgaaacgc cgtagcgccg atggtagtgt
721 ggggtctccc catgcgagag tagggaactg ccaggcatca aataaaacga aaggctcagt
781 cgaaagactg ggcctttcgt tttatctgtt gtttgtcggt gaacgctctc ctgagtagga
841 caaatccgcc gggagcggat ttgaacgttg cgaagcaacg gcccggaggg tggcgggcag
901 gacgcccgcc ataaactgcc aggcatcaaa ttaagcagaa ggccatcctg acggatggcc
961 tttttgcgtt tctacaaact ctttttgttt atttttctaa atacattcaa atatgtatcc
1021 gctcatgaga caataaccct gataaatgct tcaataatat tgaaaaagga agagtatgag
1081 tattcaacat ttccgtgtcg cccttattcc cttttttgcg gcattttgcc ttcctgtttt
1141 tgctcaccca gaaacgctgg tgaaagtaaa agatgctgaa gatcagttgg gtgcacgagt
1201 gggttacatc gaactggatc tcaacagcgg taagatcctt gagagttttc gccccgaaga
1261 acgttttcca atgatgagca cttttaaagt tctgctatgt ggcgcggtat tatcccgtgt
1321 tgacgccggg caagagcaac tcggtcgccg catacactat tctcagaatg acttggttga
1381 gtactcacca gtcacagaaa agcatcttac ggatggcatg acagtaagag aattatgcag
1441 tgctgccata accatgagtg ataacactgc ggccaactta cttctgacaa cgatcggagg
1501 accgaaggag ctaaccgctt ttttgcacaa catgggggat catgtaactc gccttgatcg
1561 ttgggaaccg gagctgaatg aagccatacc aaacgacgag cgtgacacca cgatgcctgt
1621 agcaatggca acaacgttgc gcaaactatt aactggcgaa ctacttactc tagcttcccg
1681 gcaacaatta atagactgga tggaggcgga taaagttgca ggaccacttc tgcgctcggc
1741 ccttccggct ggctggttta ttgctgataa atctggagcc ggtgagcgtg ggtctcgcgg
1801 tatcattgca gcactggggc cagatggtaa gccctcccgt atcgtagtta tctacacgac
1861 ggggagtcag gcaactatgg atgaacgaaa tagacagatc gctgagatag gtgcctcact
1921 gattaagcat tggtaactgt cagaccaagt ttactcatat atactttaga ttgatttaaa
1981 acttcatttt taatttaaaa ggatctaggt gaagatcctt tttgataatc tcatgaccaa
2041 aatcccttaa cgtgagtttt cgttccactg agcgtcagac cccgtagaaa agatcaaagg
2101 atcttcttga gatccttttt ttctgcgcgt aatctgctgc ttgcaaacaa aaaaaccacc
2161 gctaccagcg gtggtttgtt tgccggatca agagctacca actctttttc cgaaggtaac
2221 tggcttcagc agagcgcaga taccaaatac tgtccttcta gtgtagccgt agttaggcca
2281 ccacttcaag aactctgtag caccgcctac atacctcgct ctgctaatcc tgttaccagt
2341 ggctgctgcc agtggcgata agtcgtgtct taccgggttg gactcaagac gatagttacc
2401 ggataaggcg cagcggtcgg gctgaacggg gggttcgtgc acacagccca gcttggagcg
2461 aacgacctac accgaactga gatacctaca gcgtgagcta tgagaaagcg ccacgcttcc
2521 cgaagggaga aaggcggaca ggtatccggt aagcggcagg gtcggaacag gagagcgcac
2581 gagggagctt ccagggggaa acgcctggta tctttatagt cctgtcgggt ttcgccacct
2641 ctgacttgag cgtcgatttt tgtgatgctc gtcagggggg cggagcctat ggaaaaacgc
2701 cagcaacgcg gcctttttac ggttcctggc cttttgctgg ccttttgctc acatgttctt
2761 tcctgcgtta tcccctgatt ctgtggataa ccgtattacc gcctttgagt gagctgatac
2821 cgctcgccgc agccgaacga ccgagcgcag cgagtcagtg agcgaggaag cggaagagcg
2881 cctgatgcgg tattttctcc ttacgcatct gtgcggtatt tcacaccgca tatggtgcac
2941 tctcagtaca atctgctctg atgccgcata gttaagccag tatacactcc gctatcgcta
3001 cgtgactggg tcatggctgc gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc gccctgacgg
3061 gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg gagctgcatg
3121 tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgaggc agcagatcaa ttcgcgcgcg
3181 aaggcgaagc ggcatgcatt tacgttgaca ccatcgaatg gtgcaaaacc tttcgcggta
3241 tggcatgata gcgcccggaa gagagtcaat tcagggtggt gaatgtgaaa ccagtaacgt
3301 tatacgatgt cgcagagtat gccggtgtct cttatcagac cgtttcccgc gtggtgaacc
3361 aggccagcca cgtttctgcg aaaacgcggg aaaaagtgga agcggcgatg gcggagctga
3421 attacattcc caaccgcgtg gcacaacaac tggcgggcaa acagtcgttg ctgattggcg
3481 ttgccacctc cagtctggcc ctgcacgcgc cgtcgcaaat tgtcgcggcg attaaatctc
3541 gcgccgatca actgggtgcc agcgtggtgg tgtcgatggt agaacgaagc ggcgtcgaag
3601 cctgtaaagc ggcggtgcac aatcttctcg cgcaacgcgt cagtgggctg atcattaact
3661 atccgctgga tgaccaggat gccattgctg tggaagctgc ctgcactaat gttccggcgt
3721 tatttcttga tgtctctgac cagacaccca tcaacagtat tattttctcc catgaagacg
3781 gtacgcgact gggcgtggag catctggtcg cattgggtca ccagcaaatc gcgctgttag
3841 cgggcccatt aagttctgtc tcggcgcgtc tgcgtctggc tggctggcat aaatatctca
3901 ctcgcaatca aattcagccg atagcggaac gggaaggcga ctggagtgcc atgtccggtt
3961 ttcaacaaac catgcaaatg ctgaatgagg gcatcgttcc cactgcgatg ctggttgcca
4021 acgatcagat ggcgctgggc gcaatgcgcg ccattaccga gtccgggctg cgcgttggtg
4081 cggatatctc ggtagtggga tacgacgata ccgaagacag ctcatgttat atcccgccgt
4141 caaccaccat caaacaggat tttcgcctgc tggggcaaac cagcgtggac cgcttgctgc
4201 aactctctca gggccaggcg gtgaagggca atcagctgtt gcccgtctca ctggtgaaaa
4261 gaaaaaccac cctggcgccc aatacgcaaa ccgcctctcc ccgcgcgttg gccgattcat
4321 taatgcagct ggcacgacag gtttcccgac tggaaagcgg gcagtgagcg caacgcaatt
4381 aatgtgagtt agcgcgaatt gatctg
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