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pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒
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pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒
产品资料
pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒其目的是产生maltose -binding protein(MBP)fuUNK,在这里,可以将感兴趣的蛋白质与特定蛋白酶因子Xa分离。用这个载体进行的MBP融合表达为细胞质。MBP已经被设计用于对直链淀粉的更紧密的结合。pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒一个基因或开放的阅读框插入到向量多连结器的限制位点,在相同的平动读帧中为男性基因(编码maltose -binding protein)。由此产生的融合蛋白可通过直链淀粉亲和层析纯化。四种氨基酸的序列编码在XmnI位点上游。
产品描述
pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒
产品信息
基本信息
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY0347
pMal-c5X大肠pMal系列表达质粒
1μg
¥请加QQ询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
Tac
复制子:
ColE1 ori
终止子:
rrnB T1 terminator
质粒分类:
大肠杆菌载体;pMal系列表达质粒
质粒大小:
5677bp
原核抗性:
氨苄青霉素Amp
克隆菌株:
大肠杆菌DH5α
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
大肠杆菌BL21(DE3)
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
质粒简介
The vector pMAL-c5X is designed to produce maltose-binding protein (MBP) fusions, where the protein of interest can be cleaved from MBP with the specific protease Factor Xa . MBP fusions made with this vector are expressed cytoplasmically. The MBP has been engineered for tighter binding to amylose resin. A gene or open reading frame is inserted into a restriction site of the vector polylinker, in the same translational reading frame as the malE gene (encoding maltose-binding protein). The fusion protein thus produced can be purified by amylose affinity chromatography. The sequence coding for the four amino acids Ile-Glu-Gly-Arg is present just upstream of the XmnI site. This allows the protein of interest to be cleaved from maltose-binding protein with the specific protease Factor Xa. Fragments inserted in the XmnI site (cleaves GAAGG↓ATTTC) will produce a fusion protein that, after Factor Xa cleavage, contains no vector-derived residues on the protein of interest.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5677 bp ds-DNA circular SYN 17-08-2015
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pMal-c5X
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5677)
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5677
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 3..80
/gene="lacI (mutant)"
/note="lacIq promoter"
/note="In the lacIq allele, a single base change in the
promoter boosts expression of the lacI gene about 10-fold."
CDS 81..1163
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
misc_feature 1406..1434
/note="tac promoter"
/note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and
lac UV5 promoters"
protein_bind 1442..1458
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
CDS 1528..2628
/codon_start=1
/gene="malE (mutated)"
/product="maltose binding protein from E. coli"
/note="MBP"
/note="This version of the gene does not encode a signal
sequence, so MBP will remain in the cytosol."
/translation="MKIEEGKLVIWINGDKGYNGLAEVGKKFEKDTGIKVTVEHPDKLE
EKFPQVAATGDGPDIIFWAHDRFGGYAQSGLLAEITPDKAFQDKLYPFTWDAVRYNGKL
IAYPIAVEALSLIYNKDLLPNPPKTWEEIPALDKELKAKGKSALMFNLQEPYFTWPLIA
ADGGYAFKYENGKYDIKDVGVDNAGAKAGLTFLVDLIKNKHMNADTDYSIAEAAFNKGE
TAMTINGPWAWSNIDTSKVNYGVTVLPTFKGQPSKPFVGVLSAGINAASPNKELAKEFL
ENYLLTDEGLEAVNKDKPLGAVALKSYEEELVKDPRIAATMENAQKGEIMPNIPQMSAF
WYAVRTAVINAASGRQTVDEALKDAQT"
CDS 2677..2688
/codon_start=1
/product="Factor Xa recognition and cleavage site"
/note="Factor Xa site"
/translation="IEGR"
terminator 2763..2849
/gene="Escherichia coli rrnB"
/note="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 2941..2968
/note="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 2996..3086
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 3087..3947
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 4035..4623
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4993..5184)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
ORIGIN
1 ccgacaccat cgaatggtgc aaaacctttc gcggtatggc atgatagcgc ccggaagaga
61 gtcaattcag ggtggtgaat gtgaaaccag taacgttata cgatgtcgca gagtatgccg
121 gtgtctctta tcagaccgtt tcccgcgtgg tgaaccaggc cagccacgtt tctgcgaaaa
181 cgcgggaaaa agtggaagcg gcgatggcgg agctgaatta cattcccaac cgcgtggcac
241 aacaactggc gggcaaacag tcgttgctga ttggcgttgc cacctccagt ctggccctgc
301 acgcgccgtc gcaaattgtc gcggcgatta aatctcgcgc cgatcaactg ggtgccagcg
361 tggtggtgtc gatggtagaa cgaagcggcg tcgaagcctg taaagcggcg gtgcacaatc
421 ttctcgcgca acgcgtcagt gggctgatca ttaactatcc gctggatgac caggatgcca
481 ttgctgtgga agctgcctgc actaatgttc cggcgttatt tcttgatgtc tctgaccaga
541 cacccatcaa cagtattatt ttctcccatg aagacggtac gcgactgggc gtggagcatc
601 tggtcgcatt gggtcaccag caaatcgcgc tgttagcggg cccattaagt tctgtctcgg
661 cgcgtctgcg tctggctggc tggcataaat atctcactcg caatcaaatt cagccgatag
721 cggaacggga aggcgactgg agtgccatgt ccggttttca acaaaccatg caaatgctga
781 atgagggcat cgttcccact gcgatgctgg ttgccaacga tcagatggcg ctgggcgcaa
841 tgcgcgccat taccgagtcc gggctgcgcg ttggtgcgga tatttcggta gtgggatacg
901 acgataccga agacagctca tgttatatcc cgccgttaac caccatcaaa caggattttc
961 gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct tgctgcaact ctctcagggc caggcggtga
1021 agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg tgaaaagaaa aaccaccctg gcgcccaata
1081 cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca cgacaggttt
1141 cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaatg taagttagct cactcattag
1201 gcacaattct catgtttgac agcttatcat cgactgcacg gtgcaccaat gcttctggcg
1261 tcaggcagcc atcggaagct gtggtatggc tgtgcaggtc gtaaatcact gcataattcg
1321 tgtcgctcaa ggcgcactcc cgttctggat aatgtttttt gcgccgacat cataacggtt
1381 ctggcaaata ttctgaaatg agctgttgac aattaatcat cggctcgtat aatgtgtgga
1441 attgtgagcg gataacaatt tcacacagga aacagccagt ccgtttaggt gttttcacga
1501 gcaattgacc aacaaggacc atagattatg aaaatcgaag aaggtaaact ggtaatctgg
1561 attaacggcg ataaaggcta taacggtctc gctgaagtcg gtaagaaatt cgagaaagat
1621 accggaatta aagtcaccgt tgagcatccg gataaactgg aagagaaatt cccacaggtt
1681 gcggcaactg gcgatggccc tgacattatc ttctgggcac acgaccgctt tggtggctac
1741 gctcaatctg gcctgttggc tgaaatcacc ccggacaaag cgttccagga caagctgtat
1801 ccgtttacct gggatgccgt acgttacaac ggcaagctga ttgcttaccc gatcgctgtt
1861 gaagcgttat cgctgattta taacaaagat ctgctgccga acccgccaaa aacctgggaa
1921 gagatcccgg cgctggataa agaactgaaa gcgaaaggta agagcgcgct gatgttcaac
1981 ctgcaagaac cgtacttcac ctggccgctg attgctgctg acgggggtta tgcgttcaag
2041 tatgaaaacg gcaagtacga cattaaagac gtgggcgtgg ataacgctgg cgcgaaagcg
2101 ggtctgacct tcctggttga cctgattaaa aacaaacaca tgaatgcaga caccgattac
2161 tccatcgcag aagctgcctt taataaaggc gaaacagcga tgaccatcaa cggcccgtgg
2221 gcatggtcca acatcgacac cagcaaagtg aattatggtg taacggtact gccgaccttc
2281 aagggtcaac catccaaacc gttcgttggc gtgctgagcg caggtattaa cgccgccagt
2341 ccgaacaaag agctggcaaa agagttcctc gaaaactatc tgctgactga tgaaggtctg
2401 gaagcggtta ataaagacaa accgctgggt gccgtagcgc tgaagtctta cgaggaagag
2461 ttggtgaaag atccgcgtat tgccgccact atggaaaacg cccagaaagg tgaaatcatg
2521 ccgaacatcc cgcagatgtc cgctttctgg tatgccgtgc gtactgcggt gatcaacgcc
2581 gccagcggtc gtcagactgt cgatgaagcc ctgaaagacg cgcagactaa ttcgagctcg
2641 aacaacaaca acaataacaa taacaacaac ctcgggatcg agggaaggat ttcacatatg
2701 tccatgggcg gccgcgatat cgtcgacgga tccgaattcc ctgcaggtaa ttaaataagc
2761 ttcaaataaa acgaaaggct cagtcgaaag actgggcctt tcgttttatc tgttgtttgt
2821 cggtgaacgc tctcctgagt aggacaaatc cgccgggagc ggatttgaac gttgcgaagc
2881 aacggcccgg agggtggcgg gcaggacgcc cgccataaac tgccaggcat caaattaagc
2941 agaaggccat cctgacggat ggcctttttg cgtttctaca aactctttcg gtccgttgtt
3001 tatttttcta aatacattca aatatgtatc cgctcatgag acaataaccc tgataaatgc
3061 ttcaataata ttgaaaaagg aagagtatga gtattcaaca tttccgtgtc gcccttattc
3121 ccttttttgc ggcattttgc cttcctgttt ttgctcaccc agaaacgctg gtgaaagtaa
3181 aagatgctga agatcagttg ggtgcacgag tgggttacat cgaactggat ctcaacagcg
3241 gtaagatcct tgagagtttt cgccccgaag aacgtttccc aatgatgagc acttttaaag
3301 ttctgctatg tggcgcggta ttatcccgtg ttgacgccgg gcaagagcaa ctcggtcgcc
3361 gcatacacta ttctcagaat gacttggttg agtactcacc agtcacagaa aagcatctta
3421 cggatggcat gacagtaaga gaattatgca gtgctgccat aaccatgagt gataacactg
3481 cggccaactt acttctgaca acgatcggag gaccgaagga gctaaccgct tttttgcaca
3541 acatggggga tcatgtaact cgccttgatc gttgggaacc ggagctgaat gaagccatac
3601 caaacgacga gcgtgacacc acgatgcctg tagcaatggc aacaacgttg cgcaaactat
3661 taactggcga actacttact ctagcttccc ggcaacaatt aatagactgg atggaggcgg
3721 ataaagttgc aggaccactt ctgcgctcgg cccttccggc tggctggttt attgctgata
3781 aatctggagc cggtgagcgt gggtctcgcg gtatcattgc agcactgggg ccagatggta
3841 agccctcccg tatcgtagtt atctacacga cggggagtca ggcaactatg gatgaacgaa
3901 atagacagat cgctgagata ggtgcctcac tgattaagca ttggtaactg tcagaccaag
3961 tttactcata tatactttag attgatttcc ttaggactga gcgtcaaccc cgtagaaaag
4021 atcaaaggat cttcttgaga tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa
4081 aaaccaccgc taccagcggt ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg
4141 aaggtaactg gcttcagcag agcgcagata ccaaatactg tccttctagt gtagccgtag
4201 ttaggccacc acttcaagaa ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg
4261 ttaccagtgg ctgctgccag tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga
4321 tagttaccgg ataaggcgca gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc
4381 ttggagcgaa cgacctacac cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc
4441 acgcttcccg aagggagaaa ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga
4501 gagcgcacga gggagcttcc agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt
4561 cgccacctct gacttgagcg tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg
4621 aaaaacgcca gcaacgcggc ctttttacgg ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac
4681 atgttctttc ctgcgttatc ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga
4741 gctgataccg ctcgccgcag ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg
4801 gaagagcgcc tgatgcggta ttttctcctt acgcatctgt gcggtatttc acaccgcata
4861 taaggtgcac tgtgactggg tcatggctgc gccccgacac ccgccaacac ccgctgacgc
4921 gccctgacgg gcttgtctgc tcccggcatc cgcttacaga caagctgtga ccgtctccgg
4981 gagctgcatg tgtcagaggt tttcaccgtc atcaccgaaa cgcgcgaggc agctgcggta
5041 aagctcatca gcgtggtcgt gcagcgattc acagatgtct gcctgttcat ccgcgtccag
5101 ctcgttgagt ttctccagaa gcgttaatgt ctggcttctg ataaagcggg ccatgttaag
5161 ggcggttttt tcctgtttgg tcactgatgc ctccgtgtaa gggggatttc tgttcatggg
5221 ggtaatgata ccgatgaaac gagagaggat gctcacgata cgggttactg atgatgaaca
5281 tgcccggtta ctggaacgtt gtgagggtaa acaactggcg gtatggatgc ggcgggacca
5341 gagaaaaatc actcagggtc aatgccagcg cttcgttaat acagatgtag gtgttccaca
5401 gggtagccag cagcatcctg cgatgcagat ccggaacata atggtgcagg gcgctgactt
5461 ccgcgtttcc agactttacg aaacacggaa accgaagacc attcatgttg ttgctcaggt
5521 cgcagacgtt ttgcagcagc agtcgcttca cgttcgctcg cgtatcggtg attcattctg
5581 ctaaccagta aggcaacccc gccagcctag ccgggtcctc aacgacagga gcacgatcat
5641 gcgcacccgt ggccaggacc caacgctgcc cgaaatt
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