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pET-32c
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pET-32c
产品资料
pET-32c
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pET-32c
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pET-32c菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。pET-32c收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。
产品描述
pET-32c
产品信息
基本信息
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY0326
pET-32c
20μl
¥请加QQ询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
T7/laco promoter
复制子:
ColE1 ori,F1 ori
终止子:
T7 terminator
质粒分类:
大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
质粒大小:
5901bp
质粒标签:
N-Trx,N-6×His,N-thrombin,N-S,N-enterokinase,C-6×His
原核抗性:
氨苄青霉素Amp
克隆菌株:
大肠杆菌DH5α
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
大肠杆菌BL21(DE3)
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物:
T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
质粒简介
pET-32C质粒是一个大肠杆菌表达载体,T7启动子驱动TrxA促溶标签和目的蛋白融合表达。
The pET-32 series is designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fused with the 109aa Trx•Tag thioredoxin protein . Cloning sites are available for producing fusion proteins also containing cleavable His•Tag and S•Tag sequences for detection and purification. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer .
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5901 bp ds-DNA circular SYN 30-AUG-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pET-32c
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5901)
TITLE Direct Submission
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5901
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 26..73
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
CDS complement(140..157)
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
CDS complement(220..234)
/codon_start=1
/product="enterokinase recognition and cleavage site"
/note="enterokinase site"
/translation="DDDDK"
CDS complement(250..294)
/codon_start=1
/product="affinity and epitope tag derived from pancreatic
ribonuclease A"
/note="S-Tag"
/translation="KETAAAKFERQHMDS"
CDS complement(301..318)
/codon_start=1
/product="thrombin recognition and cleavage site"
/note="thrombin site"
/translation="LVPRGS"
CDS complement(328..345)
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
CDS complement(367..693)
/codon_start=1
/gene="trxA"
/product="E. coli thioredoxin"
/note="TrxA"
/translation="MSDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAEWCGPCKMIAPILDE
IADEYQGKLTVAKLNIDQNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKNGEVAATKVGALSKGQLKEFL
DANLA"
protein_bind 738..762
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(763..781)
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 1094..1171
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
CDS 1172..2254
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
CDS 3063..3254
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
rep_origin complement(3684..4272)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number colE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(4443..5303)
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(5304..5408)
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
rep_origin complement(5435..5890)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccacagata tcccatggcc ttgtcgtcgt cgtcggtacc
241 cagatctggg ctgtccatgt gctggcgttc gaatttagca gcagcggttt ctttcatacc
301 agaaccgcgt ggcaccagac cagaagaatg atgatgatga tggtgcatat ggccagaacc
361 agaaccggcc aggttagcgt cgaggaactc tttcaactga cctttagaca gtgcacccac
421 tttggttgcc gccacttcac cgtttttgaa cagcagcaga gtcgggatac cacggatgcc
481 atatttcggc gcagtgccag ggttttgatc gatgttcagt tttgcaacgg tcagtttgcc
541 ctgatattcg tcagcgattt catccagaat cggggcgatc attttgcacg gaccgcacca
601 ctctgcccag aaatcgacga ggatcgcccc gtccgctttg agtacatccg tgtcaaaact
661 gtcgtcagtc aggtgaataa ttttatcgct catatgtata tctccttctt aaagttaaac
721 aaaattattt ctagagggga attgttatcc gctcacaatt cccctatagt gagtcgtatt
781 aatttcgcgg gatcgagatc gatctcgatc ctctacgccg gacgcatcgt ggccggcatc
841 accggcgcca caggtgcggt tgctggcgcc tatatcgccg acatcaccga tggggaagat
901 cgggctcgcc acttcgggct catgagcgct tgtttcggcg tgggtatggt ggcaggcccc
961 gtggccgggg gactgttggg cgccatctcc ttgcatgcac cattccttgc ggcggcggtg
1021 ctcaacggcc tcaacctact actgggctgc ttcctaatgc aggagtcgca taagggagag
1081 cgtcgagatc ccggacacca tcgaatggcg caaaaccttt cgcggtatgg catgatagcg
1141 cccggaagag agtcaattca gggtggtgaa tgtgaaacca gtaacgttat acgatgtcgc
1201 agagtatgcc ggtgtctctt atcagaccgt ttcccgcgtg gtgaaccagg ccagccacgt
1261 ttctgcgaaa acgcgggaaa aagtggaagc ggcgatggcg gagctgaatt acattcccaa
1321 ccgcgtggca caacaactgg cgggcaaaca gtcgttgctg attggcgttg ccacctccag
1381 tctggccctg cacgcgccgt cgcaaattgt cgcggcgatt aaatctcgcg ccgatcaact
1441 gggtgccagc gtggtggtgt cgatggtaga acgaagcggc gtcgaagcct gtaaagcggc
1501 ggtgcacaat cttctcgcgc aacgcgtcag tgggctgatc attaactatc cgctggatga
1561 ccaggatgcc attgctgtgg aagctgcctg cactaatgtt ccggcgttat ttcttgatgt
1621 ctctgaccag acacccatca acagtattat tttctcccat gaagacggta cgcgactggg
1681 cgtggagcat ctggtcgcat tgggtcacca gcaaatcgcg ctgttagcgg gcccattaag
1741 ttctgtctcg gcgcgtctgc gtctggctgg ctggcataaa tatctcactc gcaatcaaat
1801 tcagccgata gcggaacggg aaggcgactg gagtgccatg tccggttttc aacaaaccat
1861 gcaaatgctg aatgagggca tcgttcccac tgcgatgctg gttgccaacg atcagatggc
1921 gctgggcgca atgcgcgcca ttaccgagtc cgggctgcgc gttggtgcgg acatctcggt
1981 agtgggatac gacgataccg aagacagctc atgttatatc ccgccgttaa ccaccatcaa
2041 acaggatttt cgcctgctgg ggcaaaccag cgtggaccgc ttgctgcaac tctctcaggg
2101 ccaggcggtg aagggcaatc agctgttgcc cgtctcactg gtgaaaagaa aaaccaccct
2161 ggcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc gattcattaa tgcagctggc
2221 acgacaggtt tcccgactgg aaagcgggca gtgagcgcaa cgcaattaat gtaagttagc
2281 tcactcatta ggcaccggga tctcgaccga tgcccttgag agccttcaac ccagtcagct
2341 ccttccggtg ggcgcggggc atgactatcg tcgccgcact tatgactgtc ttctttatca
2401 tgcaactcgt aggacaggtg ccggcagcgc tctgggtcat tttcggcgag gaccgctttc
2461 gctggagcgc gacgatgatc ggcctgtcgc ttgcggtatt cggaatcttg cacgccctcg
2521 ctcaagcctt cgtcactggt cccgccacca aacgtttcgg cgagaagcag gccattatcg
2581 ccggcatggc ggccccacgg gtgcgcatga tcgtgctcct gtcgttgagg acccggctag
2641 gctggcgggg ttgccttact ggttagcaga atgaatcacc gatacgcgag cgaacgtgaa
2701 gcgactgctg ctgcaaaacg tctgcgacct gagcaacaac atgaatggtc ttcggtttcc
2761 gtgtttcgta aagtctggaa acgcggaagt cagcgccctg caccattatg ttccggatct
2821 gcatcgcagg atgctgctgg ctaccctgtg gaacacctac atctgtatta acgaagcgct
2881 ggcattgacc ctgagtgatt tttctctggt cccgccgcat ccataccgcc agttgtttac
2941 cctcacaacg ttccagtaac cgggcatgtt catcatcagt aacccgtatc gtgagcatcc
3001 tctctcgttt catcggtatc attaccccca tgaacagaaa tcccccttac acggaggcat
3061 cagtgaccaa acaggaaaaa accgccctta acatggcccg ctttatcaga agccagacat
3121 taacgcttct ggagaaactc aacgagctgg acgcggatga acaggcagac atctgtgaat
3181 cgcttcacga ccacgctgat gagctttacc gcagctgcct cgcgcgtttc ggtgatgacg
3241 gtgaaaacct ctgacacatg cagctcccgg agacggtcac agcttgtctg taagcggatg
3301 ccgggagcag acaagcccgt cagggcgcgt cagcgggtgt tggcgggtgt cggggcgcag
3361 ccatgaccca gtcacgtagc gatagcggag tgtatactgg cttaactatg cggcatcaga
3421 gcagattgta ctgagagtgc accatatatg cggtgtgaaa taccgcacag atgcgtaagg
3481 agaaaatacc gcatcaggcg ctcttccgct tcctcgctca ctgactcgct gcgctcggtc
3541 gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg taatacggtt atccacagaa
3601 tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc agcaaaaggc caggaaccgt
3661 aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc cccctgacga gcatcacaaa
3721 aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac tataaagata ccaggcgttt
3781 ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc tgccgcttac cggatacctg
3841 tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata gctcacgctg taggtatctc
3901 agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc acgaaccccc cgttcagccc
3961 gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca acccggtaag acacgactta
4021 tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag cgaggtatgt aggcggtgct
4081 acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta gaaggacagt atttggtatc
4141 tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg gtagctcttg atccggcaaa
4201 caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa
4261 aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa
4321 aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt
4381 ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac
4441 agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc
4501 atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac gggagggctt accatctggc
4561 cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata
4621 aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc cgcctccatc
4681 cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc
4741 aacgttgttg ccattgctgc aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca
4801 ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa
4861 gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca
4921 ctcatggtta tggcagcact gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt
4981 tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt
5041 tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg
5101 ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga
5161 tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc
5221 agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg
5281 acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag
5341 ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg
5401 gttccgcgca catttccccg aaaagtgcca cctgaaattg taaacgttaa tattttgtta
5461 aaattcgcgt taaatttttg ttaaatcagc tcatttttta accaataggc cgaaatcggc
5521 aaaatccctt ataaatcaaa agaatagacc gagatagggt tgagtgttgt tccagtttgg
5581 aacaagagtc cactattaaa gaacgtggac tccaacgtca aagggcgaaa aaccgtctat
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5821 gcaagtgtag cggtcacgct gcgcgtaacc accacacccg ccgcgcttaa tgcgccgcta
5881 cagggcgcgt cccattcgcc a
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