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产品资料

pCold III

pCold III
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:pCold III
  • 产品型号:
  • 产品展商:XYbscience
  • 产品文档:无相关文档
简单介绍
pCold III是利用冷休克基因CspA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在启动子下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5’非翻译区(5’UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因子切割位���和多克隆位点(MCS)位于CAPS启动子的下游。pCold III当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。
产品描述
 

pCold III

  • 产品信息
  • 基本信息
  • 质粒图谱
  • 质粒序列

产品信息

产品货号 产品名称 产品规格 优惠价
XY0074 pCold III

5μg

¥请询价

使用说明

信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。

基本信息

启动子: CspA promoter
复制子: F1 ori,ori
质粒分类: 大肠系列质粒;大肠表达质粒;pCold系列质粒
质粒大小: 4377bp
原核抗性: 氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
克隆菌株: DH5α等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: BL21等大肠杆菌
培养条件: 37℃,有氧,LB
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: pCold-F(ACGCCATATCGCCGAAAGG)
3'测序引物: pCold-R(GGCAGGGATCTTAGATTCTG)

质粒简介

         pCold III质粒是利用冷休克基因CspA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在启动子下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5’非翻译区(5’UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因子切割位点和多克隆位点(MCS)位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。

质粒序列

LOCUS       Exported                4377 bp ds-DNA     circular SYN 13-SEP-2016
DEFINITION  synthetic circular DNA
KEYWORDS    Untitled 6
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 4377)
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Exported Tuesday, September 13, 2016 from MiaoLingPlasmid
            http://www.miaolingbio.com
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4377
                     /organism="synthetic DNA construct"
                     /mol_type="other DNA"
     protein_bind    84..100
                     /bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
                     /note="lac operator"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
     rep_origin      complement(681..1136)
                     /direction=LEFT
                     /note="f1 ori"
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
                     indicates direction of (+) strand synthesis"
     promoter        1236..1340
                     /gene="bla"
                     /note="AmpR promoter"
     CDS             1341..2201
                     /codon_start=1
                     /gene="bla"
                     /product="beta-lactamase"
                     /note="AmpR"
                     /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
                     related antibiotics"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     rep_origin      2372..2960
                     /direction=RIGHT
                     /note="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     CDS             complement(3132..4214)
                     /codon_start=1
                     /gene="lacI"
                     /product="lac repressor"
                     /note="lacI"
                     /note="The lac repressor binds to the lac operator to
                     inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
                     relieved by adding lactose or
                     isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
                     /translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
                     NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
                     EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
                     EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
                     MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
                     YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
                     ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
     promoter        complement(4215..4292)
                     /gene="lacI"
                     /note="lacI promoter"
ORIGIN
        1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
       61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
      121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
      181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
      241 aagaggtaat acaccatgaa tcacaaagtg catatggagc tcggtaccct cgagggatcc
      301 gaattcaagc ttgtcgacct gcagtctaga taggtaatct ctgcttaaaa gcacagaatc
      361 taagatccct gccatttggc ggggattttt ttatttgttt tcaggaaata aataatcgat
      421 cgcgtaataa aatctattat tatttttgtg aagaataaat ttgggtgcaa tgagaatgcg
      481 caggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct
      541 cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg
      601 cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat
      661 tgtactgaga gtgcaccata aaattgtaaa cgttaatatt ttgttaaaat tcgcgttaaa
      721 tttttgttaa atcagctcat tttttaacca ataggccgaa atcggcaaaa tcccttataa
      781 atcaaaagaa tagcccgaga tagggttgag tgttgttcca gtttggaaca agagtccact
      841 attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg gcgaaaaacc gtctatcagg gcgatggccc
      901 actacgtgaa ccatcaccca aatcaagttt tttggggtcg aggtgccgta aagcactaaa
      961 tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag agcttgacgg ggaaagccgg cgaacgtggc
     1021 gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc gggcgctagg gcgctggcaa gtgtagcggt
     1081 cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc gcttaatgcg ccgctacagg gcgcgtacta
     1141 tggttgcttt gacgtatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc
     1201 atcaggcgtc aggtggcact tttcggggaa atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt
     1261 tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca tgagacaata accctgataa atgcttcaat
     1321 aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc aacatttccg tgtcgccctt attccctttt
     1381 ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg
     1441 ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga
     1501 tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc
     1561 tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac
     1621 actattctca gaatgacttg gttgagtact caccagtcac agaaaagcat cttacggatg
     1681 gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg ccataaccat gagtgataac actgcggcca
     1741 acttacttct gacaacgatc ggaggaccga aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg
     1801 gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg
     1861 acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg
     1921 gcgaactact tactctagct tcccggcaac aattaataga ctggatggag gcggataaag
     1981 ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg gtttattgct gataaatctg
     2041 gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct
     2101 cccgtatcgt agttatctac acgacgggga gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac
     2161 agatcgctga gataggtgcc tcactgatta agcattggta actgtcagac caagtttact
     2221 catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga
     2281 tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt
     2341 cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct
     2401 gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc
     2461 taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc gcagatacca aatactgttc
     2521 ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc
     2581 tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg
     2641 ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt
     2701 cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga actgagatac ctacagcgtg
     2761 agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg
     2821 gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt
     2881 atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag
     2941 gggggcggag cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt
     3001 gctggccttt tgctcacata gtcatgcccc gcgcccaccg gaaggagctg actgggttga
     3061 aggctctcaa gggcatcggt cgagatcccg gtgcctaatg agtgagctaa cttacattaa
     3121 ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat
     3181 gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt tgcgtattgg gcgccagggt ggtttttctt
     3241 ttcaccagtg agacgggcaa cagctgattg cccttcaccg cctggccctg agagagttgc
     3301 agcaagcggt ccacgctggt ttgccccagc aggcgaaaat cctgtttgat ggtggttaac
     3361 ggcgggatat aacatgagct gtcttcggta tcgtcgtatc ccactaccga gatatccgca
     3421 ccaacgcgca gcccggactc ggtaatggcg cgcattgcgc ccagcgccat ctgatcgttg
     3481 gcaaccagca tcgcagtggg aacgatgccc tcattcagca tttgcatggt ttgttgaaaa
     3541 ccggacatgg cactccagtc gccttcccgt tccgctatcg gctgaatttg attgcgagtg
     3601 agatatttat gccagccagc cagacgcaga cgcgccgaga cagaacttaa tgggcccgct
     3661 aacagcgcga tttgctggtg acccaatgcg accagatgct ccacgcccag tcgcgtaccg
     3721 tcttcatggg agaaaataat actgttgatg ggtgtctggt cagagacatc aagaaataac
     3781 gccggaacat tagtgcaggc agcttccaca gcaatggcat cctggtcatc cagcggatag
     3841 ttaatgatca gcccactgac gcgttgcgcg agaagattgt gcaccgccgc tttacaggct
     3901 tcgacgccgc ttcgttctac catcgacacc accacgctgg cacccagttg atcggcgcga
     3961 gatttaatcg ccgcgacaat ttgcgacggc gcgtgcaggg ccagactgga ggtggcaacg
     4021 ccaatcagca acgactgttt gcccgccagt tgttgtgcca cgcggttggg aatgtaattc
     4081 agctccgcca tcgccgcttc cactttttcc cgcgttttcg cagaaacgtg gctggcctgg
     4141 ttcaccacgc gggaaacggt ctgataagag acaccggcat actctgcgac atcgtataac
     4201 gttactggtt tcacattcac caccctgaat tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata
     4261 ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga
     4321 ctcctgcatt aggaagcagc ccagtagtag gttgaggccg ttgagcaccg ccgccgc
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