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pCold III
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pCold III
产品资料
pCold III
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pCold III
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pCold III是利用冷休克基因CspA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在启动子下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5’非翻译区(5’UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因子切割位���和多克隆位点(MCS)位于CAPS启动子的下游。pCold III当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。
产品描述
pCold III
产品信息
基本信息
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY0074
pCold III
5μg
¥请询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
CspA promoter
复制子:
F1 ori,ori
质粒分类:
大肠系列质粒;大肠表达质粒;pCold系列质粒
质粒大小:
4377bp
原核抗性:
氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
克隆菌株:
DH5α等大肠杆菌
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
BL21等大肠杆菌
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
pCold-F(ACGCCATATCGCCGAAAGG)
3'测序引物:
pCold-R(GGCAGGGATCTTAGATTCTG)
质粒简介
pCold III质粒是利用冷休克基因CspA启动子设计高效率蛋白质表达载体。在启动子下游处,插入了lac操纵子,以便严格控制表达。此外,5’非翻译区(5’UTR),翻译增强元件(TEE),His标签序列,Xa因子切割位点和多克隆位点(MCS)位于CAPS启动子的下游。当培养温度切换到低温时,大肠杆菌暂时停止生长,大部分的大肠杆菌蛋白质表达减少,但是一类称为冷休克蛋白的蛋白质被特异性诱导表达。
质粒序列
LOCUS Exported 4377 bp ds-DNA circular SYN 13-SEP-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS Untitled 6
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4377)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Tuesday, September 13, 2016 from MiaoLingPlasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4377
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
protein_bind 84..100
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
rep_origin complement(681..1136)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 1236..1340
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 1341..2201
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 2372..2960
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(3132..4214)
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
promoter complement(4215..4292)
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
ORIGIN
1 aaggaatggt gtggccgatt aatcataaat atgaaaaata attgttgcat cacccgccaa
61 tgcgtggctt aatgcacatc aaattgtgag cggataacaa tttgatgtgc tagcgcatat
121 ccagtgtagt aaggcaagtc ccttcaagag ttatcgttga tacccctcgt agtgcacatt
181 cctttaacgc ttcaaaatct gtaaagcacg ccatatcgcc gaaaggcaca cttaattatt
241 aagaggtaat acaccatgaa tcacaaagtg catatggagc tcggtaccct cgagggatcc
301 gaattcaagc ttgtcgacct gcagtctaga taggtaatct ctgcttaaaa gcacagaatc
361 taagatccct gccatttggc ggggattttt ttatttgttt tcaggaaata aataatcgat
421 cgcgtaataa aatctattat tatttttgtg aagaataaat ttgggtgcaa tgagaatgcg
481 caggcccttt cgtctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct
541 cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg
601 cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg ctggcttaac tatgcggcat cagagcagat
661 tgtactgaga gtgcaccata aaattgtaaa cgttaatatt ttgttaaaat tcgcgttaaa
721 tttttgttaa atcagctcat tttttaacca ataggccgaa atcggcaaaa tcccttataa
781 atcaaaagaa tagcccgaga tagggttgag tgttgttcca gtttggaaca agagtccact
841 attaaagaac gtggactcca acgtcaaagg gcgaaaaacc gtctatcagg gcgatggccc
901 actacgtgaa ccatcaccca aatcaagttt tttggggtcg aggtgccgta aagcactaaa
961 tcggaaccct aaagggagcc cccgatttag agcttgacgg ggaaagccgg cgaacgtggc
1021 gagaaaggaa gggaagaaag cgaaaggagc gggcgctagg gcgctggcaa gtgtagcggt
1081 cacgctgcgc gtaaccacca cacccgccgc gcttaatgcg ccgctacagg gcgcgtacta
1141 tggttgcttt gacgtatgcg gtgtgaaata ccgcacagat gcgtaaggag aaaataccgc
1201 atcaggcgtc aggtggcact tttcggggaa atgtgcgcgg aacccctatt tgtttatttt
1261 tctaaataca ttcaaatatg tatccgctca tgagacaata accctgataa atgcttcaat
1321 aatattgaaa aaggaagagt atgagtattc aacatttccg tgtcgccctt attccctttt
1381 ttgcggcatt ttgccttcct gtttttgctc acccagaaac gctggtgaaa gtaaaagatg
1441 ctgaagatca gttgggtgca cgagtgggtt acatcgaact ggatctcaac agcggtaaga
1501 tccttgagag ttttcgcccc gaagaacgtt ttccaatgat gagcactttt aaagttctgc
1561 tatgtggcgc ggtattatcc cgtattgacg ccgggcaaga gcaactcggt cgccgcatac
1621 actattctca gaatgacttg gttgagtact caccagtcac agaaaagcat cttacggatg
1681 gcatgacagt aagagaatta tgcagtgctg ccataaccat gagtgataac actgcggcca
1741 acttacttct gacaacgatc ggaggaccga aggagctaac cgcttttttg cacaacatgg
1801 gggatcatgt aactcgcctt gatcgttggg aaccggagct gaatgaagcc ataccaaacg
1861 acgagcgtga caccacgatg cctgtagcaa tggcaacaac gttgcgcaaa ctattaactg
1921 gcgaactact tactctagct tcccggcaac aattaataga ctggatggag gcggataaag
1981 ttgcaggacc acttctgcgc tcggcccttc cggctggctg gtttattgct gataaatctg
2041 gagccggtga gcgtgggtct cgcggtatca ttgcagcact ggggccagat ggtaagccct
2101 cccgtatcgt agttatctac acgacgggga gtcaggcaac tatggatgaa cgaaatagac
2161 agatcgctga gataggtgcc tcactgatta agcattggta actgtcagac caagtttact
2221 catatatact ttagattgat ttaaaacttc atttttaatt taaaaggatc taggtgaaga
2281 tcctttttga taatctcatg accaaaatcc cttaacgtga gttttcgttc cactgagcgt
2341 cagaccccgt agaaaagatc aaaggatctt cttgagatcc tttttttctg cgcgtaatct
2401 gctgcttgca aacaaaaaaa ccaccgctac cagcggtggt ttgtttgccg gatcaagagc
2461 taccaactct ttttccgaag gtaactggct tcagcagagc gcagatacca aatactgttc
2521 ttctagtgta gccgtagtta ggccaccact tcaagaactc tgtagcaccg cctacatacc
2581 tcgctctgct aatcctgtta ccagtggctg ctgccagtgg cgataagtcg tgtcttaccg
2641 ggttggactc aagacgatag ttaccggata aggcgcagcg gtcgggctga acggggggtt
2701 cgtgcacaca gcccagcttg gagcgaacga cctacaccga actgagatac ctacagcgtg
2761 agctatgaga aagcgccacg cttcccgaag ggagaaaggc ggacaggtat ccggtaagcg
2821 gcagggtcgg aacaggagag cgcacgaggg agcttccagg gggaaacgcc tggtatcttt
2881 atagtcctgt cgggtttcgc cacctctgac ttgagcgtcg atttttgtga tgctcgtcag
2941 gggggcggag cctatggaaa aacgccagca acgcggcctt tttacggttc ctggcctttt
3001 gctggccttt tgctcacata gtcatgcccc gcgcccaccg gaaggagctg actgggttga
3061 aggctctcaa gggcatcggt cgagatcccg gtgcctaatg agtgagctaa cttacattaa
3121 ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt cgggaaacct gtcgtgccag ctgcattaat
3181 gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt tgcgtattgg gcgccagggt ggtttttctt
3241 ttcaccagtg agacgggcaa cagctgattg cccttcaccg cctggccctg agagagttgc
3301 agcaagcggt ccacgctggt ttgccccagc aggcgaaaat cctgtttgat ggtggttaac
3361 ggcgggatat aacatgagct gtcttcggta tcgtcgtatc ccactaccga gatatccgca
3421 ccaacgcgca gcccggactc ggtaatggcg cgcattgcgc ccagcgccat ctgatcgttg
3481 gcaaccagca tcgcagtggg aacgatgccc tcattcagca tttgcatggt ttgttgaaaa
3541 ccggacatgg cactccagtc gccttcccgt tccgctatcg gctgaatttg attgcgagtg
3601 agatatttat gccagccagc cagacgcaga cgcgccgaga cagaacttaa tgggcccgct
3661 aacagcgcga tttgctggtg acccaatgcg accagatgct ccacgcccag tcgcgtaccg
3721 tcttcatggg agaaaataat actgttgatg ggtgtctggt cagagacatc aagaaataac
3781 gccggaacat tagtgcaggc agcttccaca gcaatggcat cctggtcatc cagcggatag
3841 ttaatgatca gcccactgac gcgttgcgcg agaagattgt gcaccgccgc tttacaggct
3901 tcgacgccgc ttcgttctac catcgacacc accacgctgg cacccagttg atcggcgcga
3961 gatttaatcg ccgcgacaat ttgcgacggc gcgtgcaggg ccagactgga ggtggcaacg
4021 ccaatcagca acgactgttt gcccgccagt tgttgtgcca cgcggttggg aatgtaattc
4081 agctccgcca tcgccgcttc cactttttcc cgcgttttcg cagaaacgtg gctggcctgg
4141 ttcaccacgc gggaaacggt ctgataagag acaccggcat actctgcgac atcgtataac
4201 gttactggtt tcacattcac caccctgaat tgactctctt ccgggcgcta tcatgccata
4261 ccgcgaaagg ttttgcgcca ttcgatggtg tccgggatct cgacgctctc ccttatgcga
4321 ctcctgcatt aggaagcagc ccagtagtag gttgaggccg ttgagcaccg ccgccgc
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