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pET-19b
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pET-19b
产品资料
pET-19b
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pET-19b
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pET-19b是一种原核表达载体,N端含有一个10×His标签和BamHI限制性内切酶位点。pET-19b表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导,目的基因被克隆到质粒载体上,受噬菌体强转录及翻译信号控制。
产品描述
pET-19b
产品信息
基本信息
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY0015
pET-19b
5μg
¥请询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
T7/lac
复制子:
ColE1 ori
终止子:
T7 terminator
质粒分类:
大肠系列质粒;大肠表达质粒;pET系列质粒
质粒大小:
5717bp
质粒标签:
N-His, N-EK
原核抗性:
氨苄青霉素Amp(100μg/ml)
克隆菌株:
DH5α等大肠杆菌
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
BL21(DE3)等大肠杆菌
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
T7(TAATACGACTCACTATAGGG)
3'测序引物:
T7-ter(TGCTAGTTATTGCTCAGCGG)
质粒简介
pET-19b质粒是一种原核表达载体,N端含有一个10×His标签和BamHI限制性内切酶位点。表达由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶诱导,目的基因被克隆到质粒载体上,受噬菌体强转录及翻译信号控制。
pET系统是有史以来在大肠杆菌中表达重组蛋白的功能*强大的系统,也是现今原核表达方面使用*广泛的系统。该系列质粒能很容易的通过降低诱导物的浓度来削弱蛋白表达。在非诱导条件下,可以使目的基因处于完全沉默状态而不转录。
The pET-19b vector carries an N-terminal His•Tag® sequence followed by an enterokinase site and three cloning sites. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circular map. The cloning/expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymeraseis shown below.
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5717 bp ds-DNA circular SYN 14-JUN-2017
DEFINITION synthetic circular DNA
KEYWORDS pET-19b
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5717)
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Wednesday, June 14, 2017 from miaoling plasmid
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5717
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
promoter 104..208
/gene="bla"
/note="AmpR promoter"
CDS 209..1069
/codon_start=1
/gene="bla"
/product="beta-lactamase"
/note="AmpR"
/note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and
related antibiotics"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 1240..1828
/direction=RIGHT
/note="ori"
/note="high-copy-number colE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(2258..2449)
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
CDS complement(3761..4843)
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
promoter complement(4844..4921)
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
promoter 5230..5248
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
protein_bind 5249..5273
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
CDS 5323..5352
/codon_start=1
/product="10xHis affinity tag"
/note="10xHis"
/translation="HHHHHHHHHH"
CDS 5368..5382
/codon_start=1
/product="enterokinase recognition and cleavage site"
/note="enterokinase site"
/translation="DDDDK"
terminator 5458..5505
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
promoter complement(5680..5708)
/note="tet promoter"
/note="promoter for tetracycline efflux protein gene"
ORIGIN
1 ttcttgaaga cgaaagggcc tcgtgatacg cctattttta taggttaatg tcatgataat
61 aatggtttct tagacgtcag gtggcacttt tcggggaaat gtgcgcggaa cccctatttg
121 tttatttttc taaatacatt caaatatgta tccgctcatg agacaataac cctgataaat
181 gcttcaataa tattgaaaaa ggaagagtat gagtattcaa catttccgtg tcgcccttat
241 tccctttttt gcggcatttt gccttcctgt ttttgctcac ccagaaacgc tggtgaaagt
301 aaaagatgct gaagatcagt tgggtgcacg agtgggttac atcgaactgg atctcaacag
361 cggtaagatc cttgagagtt ttcgccccga agaacgtttt ccaatgatga gcacttttaa
421 agttctgcta tgtggcgcgg tattatcccg tgttgacgcc gggcaagagc aactcggtcg
481 ccgcatacac tattctcaga atgacttggt tgagtactca ccagtcacag aaaagcatct
541 tacggatggc atgacagtaa gagaattatg cagtgctgcc ataaccatga gtgataacac
601 tgcggccaac ttacttctga caacgatcgg aggaccgaag gagctaaccg cttttttgca
661 caacatgggg gatcatgtaa ctcgccttga tcgttgggaa ccggagctga atgaagccat
721 accaaacgac gagcgtgaca ccacgatgcc tgcagcaatg gcaacaacgt tgcgcaaact
781 attaactggc gaactactta ctctagcttc ccggcaacaa ttaatagact ggatggaggc
841 ggataaagtt gcaggaccac ttctgcgctc ggcccttccg gctggctggt ttattgctga
901 taaatctgga gccggtgagc gtgggtctcg cggtatcatt gcagcactgg ggccagatgg
961 taagccctcc cgtatcgtag ttatctacac gacggggagt caggcaacta tggatgaacg
1021 aaatagacag atcgctgaga taggtgcctc actgattaag cattggtaac tgtcagacca
1081 agtttactca tatatacttt agattgattt aaaacttcat ttttaattta aaaggatcta
1141 ggtgaagatc ctttttgata atctcatgac caaaatccct taacgtgagt tttcgttcca
1201 ctgagcgtca gaccccgtag aaaagatcaa aggatcttct tgagatcctt tttttctgcg
1261 cgtaatctgc tgcttgcaaa caaaaaaacc accgctacca gcggtggttt gtttgccgga
1321 tcaagagcta ccaactcttt ttccgaaggt aactggcttc agcagagcgc agataccaaa
1381 tactgtcctt ctagtgtagc cgtagttagg ccaccacttc aagaactctg tagcaccgcc
1441 tacatacctc gctctgctaa tcctgttacc agtggctgct gccagtggcg ataagtcgtg
1501 tcttaccggg ttggactcaa gacgatagtt accggataag gcgcagcggt cgggctgaac
1561 ggggggttcg tgcacacagc ccagcttgga gcgaacgacc tacaccgaac tgagatacct
1621 acagcgtgag ctatgagaaa gcgccacgct tcccgaaggg agaaaggcgg acaggtatcc
1681 ggtaagcggc agggtcggaa caggagagcg cacgagggag cttccagggg gaaacgcctg
1741 gtatctttat agtcctgtcg ggtttcgcca cctctgactt gagcgtcgat ttttgtgatg
1801 ctcgtcaggg gggcggagcc tatggaaaaa cgccagcaac gcggcctttt tacggttcct
1861 ggccttttgc tggccttttg ctcacatgtt ctttcctgcg ttatcccctg attctgtgga
1921 taaccgtatt accgcctttg agtgagctga taccgctcgc cgcagccgaa cgaccgagcg
1981 cagcgagtca gtgagcgagg aagcggaaga gcgcctgatg cggtattttc tccttacgca
2041 tctgtgcggt atttcacacc gcatatatgg tgcactctca gtacaatctg ctctgatgcc
2101 gcatagttaa gccagtatac actccgctat cgctacgtga ctgggtcatg gctgcgcccc
2161 gacacccgcc aacacccgct gacgcgccct gacgggcttg tctgctcccg gcatccgctt
2221 acagacaagc tgtgaccgtc tccgggagct gcatgtgtca gaggttttca ccgtcatcac
2281 cgaaacgcgc gaggcagctg cggtaaagct catcagcgtg gtcgtgaagc gattcacaga
2341 tgtctgcctg ttcatccgcg tccagctcgt tgagtttctc cagaagcgtt aatgtctggc
2401 ttctgataaa gcgggccatg ttaagggcgg ttttttcctg tttggtcact gatgcctccg
2461 tgtaaggggg atttctgttc atgggggtaa tgataccgat gaaacgagag aggatgctca
2521 cgatacgggt tactgatgat gaacatgccc ggttactgga acgttgtgag ggtaaacaac
2581 tggcggtatg gatgcggcgg gaccagagaa aaatcactca gggtcaatgc cagcgcttcg
2641 ttaatacaga tgtaggtgtt ccacagggta gccagcagca tcctgcgatg cagatccgga
2701 acataatggt gcagggcgct gacttccgcg tttccagact ttacgaaaca cggaaaccga
2761 agaccattca tgttgttgct caggtcgcag acgttttgca gcagcagtcg cttcacgttc
2821 gctcgcgtat cggtgattca ttctgctaac cagtaaggca accccgccag cctagccggg
2881 tcctcaacga caggagcacg atcatgcgca cccgtggcca ggacccaacg ctgcccgaga
2941 tgcgccgcgt gcggctgctg gagatggcgg acgcgatgga tatgttctgc caagggttgg
3001 tttgcgcatt cacagttctc cgcaagaatt gattggctcc aattcttgga gtggtgaatc
3061 cgttagcgag gtgccgccgg cttccattca ggtcgaggtg gcccggctcc atgcaccgcg
3121 acgcaacgcg gggaggcaga caaggtatag ggcggcgcct acaatccatg ccaacccgtt
3181 ccatgtgctc gccgaggcgg cataaatcgc cgtgacgatc agcggtccag tgatcgaagt
3241 taggctggta agagccgcga gcgatccttg aagctgtccc tgatggtcgt catctacctg
3301 cctggacagc atggcctgca acgcgggcat cccgatgccg ccggaagcga gaagaatcat
3361 aatggggaag gccatccagc ctcgcgtcgc gaacgccagc aagacgtagc ccagcgcgtc
3421 ggccgccatg ccggcgataa tggcctgctt ctcgccgaaa cgtttggtgg cgggaccagt
3481 gacgaaggct tgagcgaggg cgtgcaagat tccgaatacc gcaagcgaca ggccgatcat
3541 cgtcgcgctc cagcgaaagc ggtcctcgcc gaaaatgacc cagagcgctg ccggcacctg
3601 tcctacgagt tgcatgataa agaagacagt cataagtgcg gcgacgatag tcatgccccg
3661 cgcccaccgg aaggagctga ctgggttgaa ggctctcaag ggcatcggtc gagatcccgg
3721 tgcctaatga gtgagctaac ttacattaat tgcgttgcgc tcactgcccg ctttccagtc
3781 gggaaacctg tcgtgccagc tgcattaatg aatcggccaa cgcgcgggga gaggcggttt
3841 gcgtattggg cgccagggtg gtttttcttt tcaccagtga gacgggcaac agctgattgc
3901 ccttcaccgc ctggccctga gagagttgca gcaagcggtc cacgctggtt tgccccagca
3961 ggcgaaaatc ctgtttgatg gtggttaacg gcgggatata acatgagctg tcttcggtat
4021 cgtcgtatcc cactaccgag atatccgcac caacgcgcag cccggactcg gtaatggcgc
4081 gcattgcgcc cagcgccatc tgatcgttgg caaccagcat cgcagtggga acgatgccct
4141 cattcagcat ttgcatggtt tgttgaaaac cggacatggc actccagtcg ccttcccgtt
4201 ccgctatcgg ctgaatttga ttgcgagtga gatatttatg ccagccagcc agacgcagac
4261 gcgccgagac agaacttaat gggcccgcta acagcgcgat ttgctggtga cccaatgcga
4321 ccagatgctc cacgcccagt cgcgtaccgt cttcatggga gaaaataata ctgttgatgg
4381 gtgtctggtc agagacatca agaaataacg ccggaacatt agtgcaggca gcttccacag
4441 caatggcatc ctggtcatcc agcggatagt taatgatcag cccactgacg cgttgcgcga
4501 gaagattgtg caccgccgct ttacaggctt cgacgccgct tcgttctacc atcgacacca
4561 ccacgctggc acccagttga tcggcgcgag atttaatcgc cgcgacaatt tgcgacggcg
4621 cgtgcagggc cagactggag gtggcaacgc caatcagcaa cgactgtttg cccgccagtt
4681 gttgtgccac gcggttggga atgtaattca gctccgccat cgccgcttcc actttttccc
4741 gcgttttcgc agaaacgtgg ctggcctggt tcaccacgcg ggaaacggtc tgataagaga
4801 caccggcata ctctgcgaca tcgtataacg ttactggttt cacattcacc accctgaatt
4861 gactctcttc cgggcgctat catgccatac cgcgaaaggt tttgcgccat tcgatggtgt
4921 ccgggatctc gacgctctcc cttatgcgac tcctgcatta ggaagcagcc cagtagtagg
4981 ttgaggccgt tgagcaccgc cgccgcaagg aatggtgcat gcaaggagat ggcgcccaac
5041 agtcccccgg ccacggggcc tgccaccata cccacgccga aacaagcgct catgagcccg
5101 aagtggcgag cccgatcttc cccatcggtg atgtcggcga tataggcgcc agcaaccgca
5161 cctgtggcgc cggtgatgcc ggccacgatg cgtccggcgt agaggatcga gatctcgatc
5221 ccgcgaaatt aatacgactc actatagggg aattgtgagc ggataacaat tcccctctag
5281 aaataatttt gtttaacttt aagaaggaga tataccatgg gccatcatca tcatcatcat
5341 catcatcatc acagcagcgg ccatatcgac gacgacgaca agcatatgct cgaggatccg
5401 gctgctaaca aagcccgaaa ggaagctgag ttggctgctg ccaccgctga gcaataacta
5461 gcataacccc ttggggcctc taaacgggtc ttgaggggtt ttttgctgaa aggaggaact
5521 atatccggat atcccgcaag aggcccggca gtaccggcat aaccaagcct atgcctacag
5581 catccagggt gacggtgccg aggatgacga tgagcgcatt gttagatttc atacacggtg
5641 cctgactgcg ttagcaattt aactgtgata aactaccgca ttaaagctta tcgatgataa
5701 gctgtcaaac atgagaa
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