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pET-33b
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pET-33b
产品资料
pET-33b
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pET-33b
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pET-33b菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。pET-33b收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。
产品描述
pET-33b
产品信息
基本信息
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY0363
pET-33b
20μl
¥请询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
T7/lac
复制子:
ColE1 ori,F1 ori
终止子:
T7 terminator
质粒分类:
大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
质粒大小:
5383bp
质粒标签:
N-6×His, N-Thrombin,C-6×His
原核抗性:
卡那霉素Kan
克隆菌株:
DH5α
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
BL21(DE3)
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物:
T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
备注:
含蛋白激酶PKA识别位点
质粒简介
The pET-33b(+) vector is derived from pET-28b(+) and carries a 15bp sequence encoding the protein kinase A (PKA) site RRASV, located between the thrombin cleavage and Nde I sites (1). Proteins expressed in pET-33b(+) can be easily purified by metal chelation chromatography (via either N- or C-terminal His•Tag® sequences) and efficiently labeled with 32P- or 33P-gATP and the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase from heart muscle. Labeled proteins can be used as direct probes in protein-protein interaction studies. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/ expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single-stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single-stranded sequencing should be performed using the T7 terminator primer .
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5383 bp ds-DNA circular SYN 31-AUG-2016
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pET-33b
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5383)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported Wednesday, August 31, 2016 from SnapGene Viewer 3.1.4
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5383
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 26..73
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
CDS complement(140..157)
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
CDS complement(206..238)
/codon_start=1
/product="leader peptide from bacteriophage T7 gene 10"
/note="T7 tag (gene 10 leader)"
/note="promotes efficient translation in E. coli"
/translation="MASMTGGQQMG"
CDS complement(257..274)
/codon_start=1
/product="thrombin recognition and cleavage site"
/note="thrombin site"
/translation="LVPRGS"
CDS complement(284..301)
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
protein_bind 357..381
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(382..400)
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 709..786
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
CDS 787..1869
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
CDS 2678..2869
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
rep_origin complement(3299..3887)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number colE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS 4009..4824
/codon_start=1
/gene="aph(3')-Ia"
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin"
/translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
rep_origin complement(4917..5372)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tcccgaccca tttgctgtcc accagtcatg ctagccatat
241 gaacagatgc acgacggctg ccgcgcggca ccaggccgct gctgtgatga tgatgatgat
301 ggctgctgcc catggtatat ctccttctta aagttaaaca aaattatttc tagaggggaa
361 ttgttatccg ctcacaattc ccctatagtg agtcgtatta atttcgcggg atcgagatct
421 cgatcctcta cgccggacgc atcgtggccg gcatcaccgg cgccacaggt gcggttgctg
481 gcgcctatat cgccgacatc accgatgggg aagatcgggc tcgccacttc gggctcatga
541 gcgcttgttt cggcgtgggt atggtggcag gccccgtggc cgggggactg ttgggcgcca
601 tctccttgca tgcaccattc cttgcggcgg cggtgctcaa cggcctcaac ctactactgg
661 gctgcttcct aatgcaggag tcgcataagg gagagcgtcg agatcccgga caccatcgaa
721 tggcgcaaaa cctttcgcgg tatggcatga tagcgcccgg aagagagtca attcagggtg
781 gtgaatgtga aaccagtaac gttatacgat gtcgcagagt atgccggtgt ctcttatcag
841 accgtttccc gcgtggtgaa ccaggccagc cacgtttctg cgaaaacgcg ggaaaaagtg
901 gaagcggcga tggcggagct gaattacatt cccaaccgcg tggcacaaca actggcgggc
961 aaacagtcgt tgctgattgg cgttgccacc tccagtctgg ccctgcacgc gccgtcgcaa
1021 attgtcgcgg cgattaaatc tcgcgccgat caactgggtg ccagcgtggt ggtgtcgatg
1081 gtagaacgaa gcggcgtcga agcctgtaaa gcggcggtgc acaatcttct cgcgcaacgc
1141 gtcagtgggc tgatcattaa ctatccgctg gatgaccagg atgccattgc tgtggaagct
1201 gcctgcacta atgttccggc gttatttctt gatgtctctg accagacacc catcaacagt
1261 attattttct cccatgaaga cggtacgcga ctgggcgtgg agcatctggt cgcattgggt
1321 caccagcaaa tcgcgctgtt agcgggccca ttaagttctg tctcggcgcg tctgcgtctg
1381 gctggctggc ataaatatct cactcgcaat caaattcagc cgatagcgga acgggaaggc
1441 gactggagtg ccatgtccgg ttttcaacaa accatgcaaa tgctgaatga gggcatcgtt
1501 cccactgcga tgctggttgc caacgatcag atggcgctgg gcgcaatgcg cgccattacc
1561 gagtccgggc tgcgcgttgg tgcggatatc tcggtagtgg gatacgacga taccgaagac
1621 agctcatgtt atatcccgcc gttaaccacc atcaaacagg attttcgcct gctggggcaa
1681 accagcgtgg accgcttgct gcaactctct cagggccagg cggtgaaggg caatcagctg
1741 ttgcccgtct cactggtgaa aagaaaaacc accctggcgc ccaatacgca aaccgcctct
1801 ccccgcgcgt tggccgattc attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg actggaaagc
1861 gggcagtgag cgcaacgcaa ttaatgtaag ttagctcact cattaggcac cgggatctcg
1921 accgatgccc ttgagagcct tcaacccagt cagctccttc cggtgggcgc ggggcatgac
1981 tatcgtcgcc gcacttatga ctgtcttctt tatcatgcaa ctcgtaggac aggtgccggc
2041 agcgctctgg gtcattttcg gcgaggaccg ctttcgctgg agcgcgacga tgatcggcct
2101 gtcgcttgcg gtattcggaa tcttgcacgc cctcgctcaa gccttcgtca ctggtcccgc
2161 caccaaacgt ttcggcgaga agcaggccat tatcgccggc atggcggccc cacgggtgcg
2221 catgatcgtg ctcctgtcgt tgaggacccg gctaggctgg cggggttgcc ttactggtta
2281 gcagaatgaa tcaccgatac gcgagcgaac gtgaagcgac tgctgctgca aaacgtctgc
2341 gacctgagca acaacatgaa tggtcttcgg tttccgtgtt tcgtaaagtc tggaaacgcg
2401 gaagtcagcg ccctgcacca ttatgttccg gatctgcatc gcaggatgct gctggctacc
2461 ctgtggaaca cctacatctg tattaacgaa gcgctggcat tgaccctgag tgatttttct
2521 ctggtcccgc cgcatccata ccgccagttg tttaccctca caacgttcca gtaaccgggc
2581 atgttcatca tcagtaaccc gtatcgtgag catcctctct cgtttcatcg gtatcattac
2641 ccccatgaac agaaatcccc cttacacgga ggcatcagtg accaaacagg aaaaaaccgc
2701 ccttaacatg gcccgcttta tcagaagcca gacattaacg cttctggaga aactcaacga
2761 gctggacgcg gatgaacagg cagacatctg tgaatcgctt cacgaccacg ctgatgagct
2821 ttaccgcagc tgcctcgcgc gtttcggtga tgacggtgaa aacctctgac acatgcagct
2881 cccggagacg gtcacagctt gtctgtaagc ggatgccggg agcagacaag cccgtcaggg
2941 cgcgtcagcg ggtgttggcg ggtgtcgggg cgcagccatg acccagtcac gtagcgatag
3001 cggagtgtat actggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag agtgcaccat
3061 atatgcggtg tgaaataccg cacagatgcg taaggagaaa ataccgcatc aggcgctctt
3121 ccgcttcctc gctcactgac tcgctgcgct cggtcgttcg gctgcggcga gcggtatcag
3181 ctcactcaaa ggcggtaata cggttatcca cagaatcagg ggataacgca ggaaagaaca
3241 tgtgagcaaa aggccagcaa aaggccagga accgtaaaaa ggccgcgttg ctggcgtttt
3301 tccataggct ccgcccccct gacgagcatc acaaaaatcg acgctcaagt cagaggtggc
3361 gaaacccgac aggactataa agataccagg cgtttccccc tggaagctcc ctcgtgcgct
3421 ctcctgttcc gaccctgccg cttaccggat acctgtccgc ctttctccct tcgggaagcg
3481 tggcgctttc tcatagctca cgctgtaggt atctcagttc ggtgtaggtc gttcgctcca
3541 agctgggctg tgtgcacgaa ccccccgttc agcccgaccg ctgcgcctta tccggtaact
3601 atcgtcttga gtccaacccg gtaagacacg acttatcgcc actggcagca gccactggta
3661 acaggattag cagagcgagg tatgtaggcg gtgctacaga gttcttgaag tggtggccta
3721 actacggcta cactagaagg acagtatttg gtatctgcgc tctgctgaag ccagttacct
3781 tcggaaaaag agttggtagc tcttgatccg gcaaacaaac caccgctggt agcggtggtt
3841 tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg atctcaagaa gatcctttga
3901 tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc acgttaaggg attttggtca
3961 tgaacaataa aactgtctgc ttacataaac agtaatacaa ggggtgttat gagccatatt
4021 caacgggaaa cgtcttgctc taggccgcga ttaaattcca acatggatgc tgatttatat
4081 gggtataaat gggctcgcga taatgtcggg caatcaggtg cgacaatcta tcgattgtat
4141 gggaagcccg atgcgccaga gttgtttctg aaacatggca aaggtagcgt tgccaatgat
4201 gttacagatg agatggtcag actaaactgg ctgacggaat ttatgcctct tccgaccatc
4261 aagcatttta tccgtactcc tgatgatgca tggttactca ccactgcgat ccccgggaaa
4321 acagcattcc aggtattaga agaatatcct gattcaggtg aaaatattgt tgatgcgctg
4381 gcagtgttcc tgcgccggtt gcattcgatt cctgtttgta attgtccttt taacagcgat
4441 cgcgtatttc gtctcgctca ggcgcaatca cgaatgaata acggtttggt tgatgcgagt
4501 gattttgatg acgagcgtaa tggctggcct gttgaacaag tctggaaaga aatgcataaa
4561 cttttgccat tctcaccgga ttcagtcgtc actcatggtg atttctcact tgataacctt
4621 atttttgacg aggggaaatt aataggttgt attgatgttg gacgagtcgg aatcgcagac
4681 cgataccagg atcttgccat cctatggaac tgcctcggtg agttttctcc ttcattacag
4741 aaacggcttt ttcaaaaata tggtattgat aatcctgata tgaataaatt gcagtttcat
4801 ttgatgctcg atgagttttt ctaagaatta attcatgagc ggatacatat ttgaatgtat
4861 ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgaaat
4921 tgtaaacgtt aatattttgt taaaattcgc gttaaatttt tgttaaatca gctcattttt
4981 taaccaatag gccgaaatcg gcaaaatccc ttataaatca aaagaataga ccgagatagg
5041 gttgagtgtt gttccagttt ggaacaagag tccactatta aagaacgtgg actccaacgt
5101 caaagggcga aaaaccgtct atcagggcga tggcccacta cgtgaaccat caccctaatc
5161 aagttttttg gggtcgaggt gccgtaaagc actaaatcgg aaccctaaag ggagcccccg
5221 atttagagct tgacggggaa agccggcgaa cgtggcgaga aaggaaggga agaaagcgaa
5281 aggagcgggc gctagggcgc tggcaagtgt agcggtcacg ctgcgcgtaa ccaccacacc
5341 cgccgcgctt aatgcgccgc tacagggcgc gtcccattcg cca
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