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pET-48b
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pET-48b
产品资料
pET-48b
如果您对该产品感兴趣的话,可以
产品名称:
pET-48b
产品型号:
产品展商:
XYbscience
产品文档:
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简单介绍
pET-48b载体含有N端Trx和His标签,在标签后面紧跟着的是HRV 3C蛋白酶切位点。HRV 3C蛋白酶能够高特异性的识别LEVLFQ↓GP蛋白序列,pET-48b能够在低温下高效切割掉融合标签序列。pET-48b载体还含有一个可选择的C端 Thrombin蛋白酶���位点,紧接着位点后是S标签。
产品描述
pET-48b
产品信息
基本信息
质粒简介
质粒图谱
质粒序列
产品信息
产品货号
产品名称
产品规格
优惠价
XY0381
pET-48b
20μl
¥请询价
使用说明
信裕质粒平台的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品的三个月内通知我司。收到质粒后请短暂离心,加入20μl ddH2O溶解质粒,取2μl转化至对应感受态中,挑取单克隆重新提取质粒后使用。如需获取其他详细信息请登录我司官网查询。
基本信息
启动子:
T7/lac
复制子:
ColE1 ori,F1 ori
终止子:
T7 terminator
质粒分类:
大肠杆菌载体;PET系列表达质粒
质粒大小:
5605bp
质粒标签:
N-Trx, N-6×His,N-HRV 3C, C-S, C-Thrombin
原核抗性:
卡那霉素Kan
克隆菌株:
DH5α
培养条件:
37℃,有氧,LB
表达宿主:
BL21(DE3)
培养条件:
37℃,有氧,LB
诱导方式:
IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物:
T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物:
T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
质粒简介
pET-48b载体含有N端Trx和His标签,在标签后面紧跟着的是HRV 3C蛋白酶切位点。HRV 3C蛋白酶能够高特异性的识别LEVLFQ↓GP蛋白序列,能够在低温下高效切割掉融合标签序列。pET-48b载体还含有一个可选择的C端 Thrombin蛋白酶切位点,紧接着位点后是S标签。
pET48b载体的单一的多克隆位点见上面的环状质粒图谱。注意:载体序列是以pBR322质粒的编码规矩进行编码的,所以T7蛋白表达区在质粒图谱上面是反向的。
T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列的作用下终止蛋白翻译。载体的单链测序应该使用S 18引物。
质粒图谱
质粒序列
LOCUS Exported 5605 bp ds-DNA circular SYN 11-8-2015
DEFINITION synthetic circular DNA
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS Untitled 3
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5605)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
JOURNAL Exported 2015-8-11 from MLCC
http://www.miaolingbio.com
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5605
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
source 775..797
/organism="Enterobacteria phage T7"
/mol_type="genomic DNA"
/db_xref="taxon:10760"
terminator 26..73
/note="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
CDS complement(168..212)
/codon_start=1
/product="affinity and epitope tag derived from pancreatic
ribonuclease A"
/note="S-Tag"
/translation="KETAAAKFERQHMDS"
CDS complement(213..230)
/codon_start=1
/product="thrombin recognition and cleavage site"
/note="thrombin site"
/translation="LVPRGS"
CDS complement(309..332)
/codon_start=1
/product="recognition and cleavage site for human
rhinovirus 3C and PreScission proteases"
/note="HRV 3C site"
/translation="LEVLFQGP"
CDS complement(342..359)
/codon_start=1
/product="6xHis affinity tag"
/note="6xHis"
/translation="HHHHHH"
CDS complement(441..767)
/codon_start=1
/gene="trxA"
/product="E. coli thioredoxin"
/note="TrxA"
/translation="MSDKIIHLTDDSFDTDVLKADGAILVDFWAEWCGPCKMIAPILDE
IADEYQGKLTVAKLNIDQNPGTAPKYGIRGIPTLLLFKNGEVAATKVGALSKGQLKEFL
DANLA"
RBS 775..797
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
protein_bind 812..836
/bound_moiety="lac repressor encoded by lacI"
/note="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
promoter complement(837..855)
/note="T7 promoter"
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
promoter 1168..1245
/gene="lacI"
/note="lacI promoter"
CDS 1246..2328
/codon_start=1
/gene="lacI"
/product="lac repressor"
/note="lacI"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
/translation="MKPVTLYDVAEYAGVSYQTVSRVVNQASHVSAKTREKVEAAMAEL
NYIPNRVAQQLAGKQSLLIGVATSSLALHAPSQIVAAIKSRADQLGASVVVSMVERSGV
EACKAAVHNLLAQRVSGLIINYPLDDQDAIAVEAACTNVPALFLDVSDQTPINSIIFSH
EDGTRLGVEHLVALGHQQIALLAGPLSSVSARLRLAGWHKYLTRNQIQPIAEREGDWSA
MSGFQQTMQMLNEGIVPTAMLVANDQMALGAMRAITESGLRVGADISVVGYDDTEDSSC
YIPPLTTIKQDFRLLGQTSVDRLLQLSQGQAVKGNQLLPVSLVKRKTTLAPNTQTASPR
ALADSLMQLARQVSRLESGQ"
CDS 2900..3091
/codon_start=1
/gene="rop"
/product="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
/note="rop"
/translation="MTKQEKTALNMARFIRSQTLTLLEKLNELDADEQADICESLHDHA
DELYRSCLARFGDDGENL"
misc_feature 3193..3335
/note="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
rep_origin complement(3521..4109)
/direction=LEFT
/note="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS 4231..5046
/codon_start=1
/product="aminoglycoside phosphotransferase"
/note="KanR"
/note="confers resistance to kanamycin in bacteria or G418
(Geneticin(R)) in eukaryotes"
/translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
rep_origin complement(5139..5594)
/direction=LEFT
/note="f1 ori"
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgtttagcag cctaggttaa ttaagcctcg agagcagcag aagtagagct gtccatgtgc
181 tggcgttcga atttagcagc agcggtttct ttactaccgc gtggcaccag agcgagctct
241 gcggccgcaa gcttgtcgac ggacgtcggg cgcgccaagg cctgtacaga attcggatcc
301 tggtacccgg gtccctgaaa gaggacttca agagccgcgg agtgatggtg atggtgatga
361 ccagaaccac tagatggagt aggagtagga ggattgttat tagaaccgcc accaccacta
421 gtatggccag aaccagaacc ggccaggtta gcgtcgagga actctttcaa ctgaccttta
481 gacagtgcac ccactttggt tgccgccact tcaccgtttt tgaacagcag cagagtcggg
541 ataccacgga tgccatattt cggcgcagtg ccagggtttt gatcgatgtt cagttttgca
601 acggtcagtt tgccctgata ttcgtcagcg atttcatcca gaatcggggc gatcattttg
661 cacggaccgc accactctgc ccagaaatcg acgaggatcg ccccgtccgc tttgagtaca
721 tccgtgtcaa aactgtcgtc agtcaggtga ataattttat cgctcatatg tatatctcct
781 tcttaaagtt aaacaaaatt atttctagag gggaattgtt atccgctcac aattccccta
841 tagtgagtcg tattaatttc gcgggatcga gatcgatctc gatcctctac gccggacgca
901 tcgtggccgg catcaccggc gccacaggtg cggttgctgg cgcctatatc gccgacatca
961 ccgatgggga agatcgggct cgccacttcg ggctcatgag cgcttgtttc ggcgtgggta
1021 tggtggcagg ccccgtggcc gggggactgt tgggcgccat ctccttgcat gcaccattcc
1081 ttgcggcggc ggtgctcaac ggcctcaacc tactactggg ctgcttccta atgcaggagt
1141 cgcataaggg agagcgtcga gatcccggac accatcgaat ggcgcaaaac ctttcgcggt
1201 atggcatgat agcgcccgga agagagtcaa ttcagggtgg tgaatgtgaa accagtaacg
1261 ttatacgatg tcgcagagta tgccggtgtc tcttatcaga ccgtttcccg cgtggtgaac
1321 caggccagcc acgtttctgc gaaaacgcgg gaaaaagtgg aagcggcgat ggcggagctg
1381 aattacattc ccaaccgcgt ggcacaacaa ctggcgggca aacagtcgtt gctgattggc
1441 gttgccacct ccagtctggc cctgcacgcg ccgtcgcaaa ttgtcgcggc gattaaatct
1501 cgcgccgatc aactgggtgc cagcgtggtg gtgtcgatgg tagaacgaag cggcgtcgaa
1561 gcctgtaaag cggcggtgca caatcttctc gcgcaacgcg tcagtgggct gatcattaac
1621 tatccgctgg atgaccagga tgccattgct gtggaagctg cctgcactaa tgttccggcg
1681 ttatttcttg atgtctctga ccagacaccc atcaacagta ttattttctc ccatgaagac
1741 ggtacgcgac tgggcgtgga gcatctggtc gcattgggtc accagcaaat cgcgctgtta
1801 gcgggcccat taagttctgt ctcggcgcgt ctgcgtctgg ctggctggca taaatatctc
1861 actcgcaatc aaattcagcc gatagcggaa cgggaaggcg actggagtgc catgtccggt
1921 tttcaacaaa ccatgcaaat gctgaatgag ggcatcgttc ccactgcgat gctggttgcc
1981 aacgatcaga tggcgctggg cgcaatgcgc gccattaccg agtccgggct gcgcgttggt
2041 gcggacatct cggtagtggg atacgacgat accgaagaca gctcatgtta tatcccgccg
2101 ttaaccacca tcaaacagga ttttcgcctg ctggggcaaa ccagcgtgga ccgcttgctg
2161 caactctctc agggccaggc ggtgaagggc aatcagctgt tgcccgtctc actggtgaaa
2221 agaaaaacca ccctggcgcc caatacgcaa accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca
2281 ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat
2341 taatgtaagt tagctcactc attaggcacc gggatctcga ccgatgccct tgagagcctt
2401 caacccagtc agctccttcc ggtgggcgcg gggcatgact agcatgatcg tgctcctgtc
2461 gttgaggacc cggctaggct ggcggggttg ccttactggt tagcagaatg aatcaccgat
2521 acgcgagcga acgtgaagcg actgctgctg caaaacgtct gcgacctgag caacaacatg
2581 aatggtcttc ggtttccgtg tttcgtaaag tctggaaacg cggaagtcag cgccctgcac
2641 cattatgttc cggatctgca tcgcaggatg ctgctggcta ccctgtggaa cacctacatc
2701 tgtattaacg aagcgctggc attgaccctg agtgattttt ctctggtccc gccgcatcca
2761 taccgccagt tgtttaccct cacaacgttc cagtaaccgg gcatgttcat catcagtaac
2821 ccgtatcgtg agcatcctct ctcgtttcat cggtatcatt acccccatga acagaaatcc
2881 cccttacacg gaggcatcag tgaccaaaca ggaaaaaacc gcccttaaca tggcccgctt
2941 tatcagaagc cagacattaa cgcttctgga gaaactcaac gagctggacg cggatgaaca
3001 ggcagacatc tgtgaatcgc ttcacgacca cgctgatgag ctttaccgca gctgcctcgc
3061 gcgtttcggt gatgacggtg aaaacctctg acacatgcag ctcccggaga cggtcacagc
3121 ttgtctgtaa gcggatgccg ggagcagaca agcccgtcag ggcgcgtcag cgggtgttgg
3181 cgggtgtcgg ggcgcagcca tgacccagtc acgtagcgat agcggagtgt atactggctt
3241 aactatgcgg catcagagca gattgtactg agagtgcacc atatatgcgg tgtgaaatac
3301 cgcacagatg cgtaaggaga aaataccgca tcaggcgctc ttccgcttcc tcgctcactg
3361 actcgctgcg ctcggtcgtt cggctgcggc gagcggtatc agctcactca aaggcggtaa
3421 tacggttatc cacagaatca ggggataacg caggaaagaa catgtgagca aaaggccagc
3481 aaaaggccag gaaccgtaaa aaggccgcgt tgctggcgtt tttccatagg ctccgccccc
3541 ctgacgagca tcacaaaaat cgacgctcaa gtcagaggtg gcgaaacccg acaggactat
3601 aaagatacca ggcgtttccc cctggaagct ccctcgtgcg ctctcctgtt ccgaccctgc
3661 cgcttaccgg atacctgtcc gcctttctcc cttcgggaag cgtggcgctt tctcatagct
3721 cacgctgtag gtatctcagt tcggtgtagg tcgttcgctc caagctgggc tgtgtgcacg
3781 aaccccccgt tcagcccgac cgctgcgcct tatccggtaa ctatcgtctt gagtccaacc
3841 cggtaagaca cgacttatcg ccactggcag cagccactgg taacaggatt agcagagcga
3901 ggtatgtagg cggtgctaca gagttcttga agtggtggcc taactacggc tacactagaa
3961 ggacagtatt tggtatctgc gctctgctga agccagttac cttcggaaaa agagttggta
4021 gctcttgatc cggcaaacaa accaccgctg gtagcggtgg tttttttgtt tgcaagcagc
4081 agattacgcg cagaaaaaaa ggatctcaag aagatccttt gatcttttct acggggtctg
4141 acgctcagtg gaacgaaaac tcacgttaag ggattttggt catgaacaat aaaactgtct
4201 gcttacataa acagtaatac aaggggtgtt atgagccata ttcaacggga aacgtcttgc
4261 tctaggccgc gattaaattc caacatggat gctgatttat atgggtataa atgggctcgc
4321 gataatgtcg ggcaatcagg tgcgacaatc tatcgattgt atgggaagcc cgatgcgcca
4381 gagttgtttc tgaaacatgg caaaggtagc gttgccaatg atgttacaga tgagatggtc
4441 agactaaact ggctgacgga atttatgcct cttccgacca tcaagcattt tatccgtact
4501 cctgatgatg catggttact caccactgcg atccccggca aaacagcatt ccaggtatta
4561 gaagaatatc ctgattcagg tgaaaatatt gttgatgcgc tggcagtgtt cctgcgccgg
4621 ttgcattcga ttcctgtttg taattgtcct tttaacagtg atcgcgtatt tcgtctcgct
4681 caggcgcaat cacgaatgaa taacggtttg gttgatgcga gtgattttga tgacgagcgt
4741 aatggctggc ctgttgaaca agtctggaaa gaaatgcata aacttttgcc attctcaccg
4801 gattcagtcg tcactcatgg tgatttctca cttgataacc ttatttttga cgaggggaaa
4861 ttaataggtt gtattgatgt tggacgagtc ggaatcgcag accgatacca ggatcttgcc
4921 atcctatgga actgcctcgg tgagttttct ccttcattac agaaacggct ttttcaaaaa
4981 tatggtattg ataatcctga tatgaataaa ttgcagtttc atttgatgct cgatgagttt
5041 ttctaagaat taattcatga gcggatacat atttgaatgt atttagaaaa ataaacaaat
5101 aggggttccg cgcacatttc cccgaaaagt gccacctgaa attgtaaacg ttaatatttt
5161 gttaaaattc gcgttaaatt tttgttaaat cagctcattt tttaaccaat aggccgaaat
5221 cggcaaaatc ccttataaat caaaagaata gaccgagata gggttgagtg ttgttccagt
5281 ttggaacaag agtccactat taaagaacgt ggactccaac gtcaaagggc gaaaaaccgt
5341 ctatcagggc gatggcccac tacgtgaacc atcaccctaa tcaagttttt tggggtcgag
5401 gtgccgtaaa gcactaaatc ggaaccctaa agggagcccc cgatttagag cttgacgggg
5461 aaagccggcg aacgtggcga gaaaggaagg gaagaaagcg aaaggagcgg gcgctagggc
5521 gctggcaagt gtagcggtca cgctgcgcgt aaccaccaca cccgccgcgc ttaatgcgcc
5581 gctacagggc gcgtcccatt cgcca
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